ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

С целью лабораторной диагностики вирусных инфекций используют 3 группы методов:

1. Быстрые (экспресс) методы - прямое обнаружение возбудителя в клиническом материале (от больного).

2. Вирусологический метод - выделение вируса из клинического материала и его идентификация.

3. Серологический метод - определение прироста (динамики) антител к вирусу (за определенный период заболевания) в парных сыворотках больного.

Выбор метода зависит от биологических свойств вируса, периода заболевания, а также технической оснащенности лаборатории.

Экспресс диагностика основана на быстром обнаружении и идентификации вируса, его антигенов или включений в биосубстратах (мазки-отпечатки, биоптаты, эпителий осадка, лейкоциты, гистологические срезы, секционный материал).

Используют методы:

а) серологический - определение вирусного антигена в исследуемом материале с помощью диагностических противовирусных сывороток в экспресс-реакциях: иммунофлуоресценция (ИФ), иммуноферментный анализ (ИФА), радиоиммунный анализ (РИА), встречный иммуноэлектрофорез (ВИЭФ), иммунная электронная микроскопия (ИЭМ), реакция прямой и обратной пассивной гемагглютинации (РПГА, РОПГА), реакция торможения обратной пассивной гемагглютинации (РТПГА);

б) микроскопический метод - обнаружение элементарных частиц или включений вирусов с помощью световой, люминесцентной или электронной микроскопии;

в) молекулярная гибридизация - гибридизация комплементарных нитей ДНК или РНК (вируса и зонда).

Вирусологическая диагностика основана на культивировании вирусов на чувствительных клеточных системах (культура клеток, куриный эмбрион, лабораторные животные).

Этапы метода:

1. Забор исследуемого материала.

2. Выбор и получение чувствительной тест-системы, определение ее жизнеспособности.

3. Заражение ее по принципу цитотропизма.

4. Индикация (обнаружение) вируса.

5. Идентификация и типирование вируса проводится на основании:

а) определения антигенов вируса в тест-системе с помощью серологических реак-

ций (ИФ, ИФА, РПГА, РТГА, РСК, РН, ВИЭФ и др.);

б) патогистологического исследования органов и тканей, типа ЦПД;

в) клинических симптомов, биологических проб (кератоконъюнктивальная и др.).

Метод относится к ранним высокочувствительным методам исследования.

Недостатки: сложность интерпретации результатов при выделении персистирующих вирусов; техническая сложность.

Серологический метод определяет нарастание титра (прирост антител) за определенный период заболевания в парных сыворотках больных или переболевших людей - с помощью набора вирусных диагностикумов.

Парные сыворотки - две сыворотки, взятые от одного больного в начале заболевания и через 1-4 недели. Серологические реакции (РПГА, РСК, РТГА, РН, ИФА и др.) ставят одновременно с двумя сыворотками для определения и сравнения их титров. Для ранней диагностики заболевания определяют наличие Ig M в одной сыворотке (в непрямой ИФ и ИФА).

Поиск по сайту: