Подготовка и микроскопия живых препаратов. Препарат «раздавленная капля»

Материал: бульонная культура дрожжеподобных грибов Сandida, предметное стекло, покровное стекло, пипетка, микроскоп

Порядок работы:

1. На обезжиренное стекло с помощью пипетки помещают небольшую каплю бульонной культуры;

2. Каплю осторожно накрывают покровным стеклом;

3. Микроскопию подготовленного препарата проводят при увеличении (х40) в обычном свете и в темном поле, для чего немного прикрывают диафрагму и опускают конденсор).

Результаты работы оформляют в виде рисунка и сравнить два способа микроскопии неокрашенных препаратов.

2. Приготовление и микроскопия фиксированных препаратов:

Материал: культуры дрожжеподобных грибов Candida, E. coli, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus sp. Lactobacillus, Bacillus subtilis, Сlostridium sp., предметные стекла, спиртовка, бактериологическая петля, пробирка с физиологическим раствором, иммерсионное масло, пипетка, микроскоп

Порядок работы:

1. На обезжиренное стекло с помощью пипетки помещают небольшую каплю воды (допускается приготовление всех препаратов на одном стекле, в этом случае необходимо четко расчертить стекло восковым карандашом)[1];

2. Бактериологическую петлю прокаливают в пламени спиртовки;

3. Взятую петлей бактериальную культуру или другой материал тщательно растирают в капле воды;

4. Остатки культуры уничтожают прожиганием в пламени спиртовки;

5. Препарат высушивают на воздухе;

6. После просушивания мазок необходимо зафиксировать на стекле.

Способы фиксации:

· над пламенем спиртовки (удерживая пинцетом, стекло проносят несколько раз над пламенем спиртовки, остужают)

· 96⁰ спиртом (на стекло наносят несколько капель спирта и оставляют до полного высыхания)

Особенности приготовление препарата из бульонной культуры:

1. Из бульонной культуры на предметное стекло при помощи пастеровской пипетки (микропипетки или петли) наносят небольшую каплю культуры

2. Использованную пипетку (наконечник микропептки) для обеспложивания опускается в сосуд с дезинфицирующим раствором, а петлю прожигают в пламени спиртовки.

7. После фиксации мазки окрашивают (способы окраски см. ниже). Микроскопию подготовленного препарата проводят с иммерсионной системой (объектив помечен черной линией), для чего необходимо поместить каплю специального масла на препарат.

8. Под иммерсией просматривают несколько полей зрения.

Результаты работы оформляют в виде рисунков, описывают морфологию клеток и по результатам микроскопии проводят предварительную идентификацию микроорганизмов в соответствии с приложением 1 и 2.

Поиск по сайту: