АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция

Методика определения оксипролина

Читайте также:
  1. III. Метод, методика, технология
  2. А. Методика розрахунків збитків внаслідок забруднення атмосферного повітря
  3. Б. Методика розрахунку збитків від забруднення водних ресурсів.
  4. Бланкові, опитувальні, рисункові і проективні психодіагностичні методики. Сутність і частота народження. Поняття про об'єктивно-маніпуляційних методиках
  5. В понятиях происходит объективация сознания в форме мысленного обнаружения и терминологического определения отдельных объектов и явлений действительности.
  6. В случае проведения запуска без определения дебита скважины с составлением АКТа ответственность за качество вывода скважины на режим возлагается на ведущего технолога ЦДНГ.
  7. Верны ли определения?
  8. Вопрос №12 Явные и неявные определения
  9. Глава 1. Экономический ущерб от пожаров и методы его определения
  10. ГОСТ 3624-92 «Молоко и молочные продукты. Титриметрические методы определения кислотности»
  11. ГОСТ 3625-84 «Молоко и молочные продукты. Методы определения плотности»
  12. ГОСТ 5867-90 «Молоко и молочные продукты. Метод определения жира»

Методика основана на выделении оксипролина при кислотном гидролизе пробы продукта, проведении реакции окисления оксипролина до пиррола и конденсации последнего с пара-диметил-аминобензальдегидом в окрашенное соединение, экстинкция которого измеряется спектрофотометрически при длине волны 560 нм.

Закладывают 12 г колбасного фарша, взвешенного с точностью до 0,001 г, в двух- или трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100см3. Добавляют 40 см3 оловянно-соляной кислоты (реактив 1), присоединяют к одному горлу обратный холодильник, а в другое горло вставляют термометр и ставят колбу в колбонагреватель. Колбонагреватель должен быть отрегулирован так, чтобы температура смеси в колбе была (110±2)°С. Гидролизуют колбасный фарш в течение 6 ч. Смесь спустя 1 ч сильно встряхивают. По окончании гидролиза колбу охлаждают, содержимое фильтруют в мерную колбу емкостью 200 см3 и доливают дистиллированной водой до метки.

Микрошприцем (150 мкл) отбирают 50 мкл смеси (для проб с очень высоким содержанием соединительной ткани — 30 мкл) в пробирку емкостью 10см3, добавляют 1 см3 хлораминного буфера (реактив 5), закрывают пробкой, встряхивают ивыдерживают при комнатной температуре 20 мин. Одновременно с этим готовят контрольную серию из трех пробирок, содержащих 50, 100 и 150 мкл калибровочного раствора оксипролина (реактив 3), что соответствует содержанию 5, 10 и 15 мкг оксипролина. В каждую из них добавляют 1 см3 хлораминного буфера и выдерживают 20 мин.

Так же готовят холостую пробу, содержащую вместо 50 мкл гидролизата 50 мкл дистиллированной воды.

После окисления хлорамином добавляют 1 см3 красителя (реактив 6) и 6 см3 этанола, закрывают пробкой, хорошо встряхивают и ставят для развития цвета на 30 мин в водяную баню с температурой 60° С. После этого все 5 пробирок охлаждают в холодной воде и спустя 10 мин измеряют оптическую плотность при длине волны 560 нм по отношению к холостому опыту.

На основе значений оптической плотности контрольной серии строят калибровочный график.

Линейность графика в соответствии с законом Ламберта—Бугера—Беера соблюдается до 15 мкг оксипролина на единицу реакционной смеси. При более высокой концентрации калибровочная кривая проходит уже нелинейно. По калибровочному графику с помощью полученного значения оптической плотности для исследуемого образца находят концентрацию оксипролина в исследуемой пробе в мкг/см3.

Массовую долю оксипролина вычисляют по формуле:

 

Х = С * 200 * 103 * 100

m * V* 10 6

где X — массовая доля оксипролина, %; С — концентрация оксипролина, найденная по калибровочному графику, мкг/cм3; 200 — объем гидролизата, cм3; 103 — коэффициент пересчета в мкл; 100 — коэффициент перевода в %; т — количество продукта, взятое для проведения анализа, г; V — количество гидролизата, взятое для цветной реакции, мкл; 106 — коэффициент пересчета в мкг.

Количество белков соединительной ткани в процентах вычисляют по формуле:

У= Х * 8,07,

где 8,07 — коэффициент пересчета на белки соединительной ткани.

Для того чтобы сделать вывод о соответствии или несоответствии полученного количества белков соединительной ткани сырью, использованному для выработки данного колбасного изделия по рецептуре, эксперту необходимо воспользоваться таблицей 6 вышеуказанных методических рекомендаций.

Из экспертной практики известно, что увеличение количества соединительных белков в вареных колбасах более чем в 2 раза вызвано нарушением технологии производства и вложением в колбасный фарш менее ценного с биологической точки зрения сырья, содержащего большое количество белков грубой соединительной ткани (например, мяса голов, свиной шкуры, белкового стабилизатора и т.п.).


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 |

Поиск по сайту:



Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.003 сек.)