Определение группы крови по Цоликлону

I этап -Свойства цоликлональных сывороток

№	Описание этапа	Техника проведения
1.	Цоликлоны анти-А и анти-Вявляются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридомные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, которые полностью идентичны по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.
2.	Культура клеток	Культура клетокодной специфичности, происходящих из одного лимфоцита, образует клетки одного клона. Главное заключается в следующем: необходимо получить от одной клетки специфические антитела и наработать их в неограниченном количестве. Трудность заключается в преодолении двух задач: во-первых, нормальные клетки после нескольких делений погибают; во-вторых, только раковые клетки способны неограниченно размножаться. Для решения этих двух несовместимых проблем в 1975 году Г. Кёлер и К. Мильштейн создали клеточные гибриды, или гибридомы. Гибридомы — это слияние нормальных лимфоцитов в питательной среде с клетками миеломы. Лимфоциты в этой среде не погибают, а от миеломного партнера получают возможность бесконечно размножаться. Таким образом, гибридомный клан размножается, а в результате этого процесса образуются моноклональные антитела.
3.	Выработка антител	Лимфоциты, несущие агтлютиноген А, вырабатывают специфическое антитело анти-А; лимфоциты, несущие агтлютиноген В, вырабатывают специфическое антитело анти-В.
4.	Состав Цоликлона	Моноклональные анти-А и анти-В антителапродуцируются двумя различными гибридомами. Цоликлоны анти-А и анти-В представляют собой разведенную асцитную жидкость мышей-носителей соответствующей гибридомы, в которой содержатся специфические иммуноглобулины класса М (IgM), направленные против группоспецифических антигенов А или В человека. Таким образом, цоликлоныне содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов.
5.	Авидность	Авидность, то есть время наступления реакции агглютинациии ее выраженность, у цоликлонов анти-А и анти-В выше, чем у изогемагглютинирующих АВО-сывороток, особенно в случае слабо выраженных антигенов эритроцитов.

II этап -Подготовка материала к исследованию

№	Описание этапа	Техника проведения
	Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки
Забор крови у пациента проводиться двумя способами
2.	Внутривенный забор крови
3.	Забор крои из пальца

III этап -Подготовка к проведению определению группы крови

№	Техника проведения
1.	Врач одевает на руки стерильные перчатки, маску, очки
2.	Получить кровь реципиента и донора.
3.	Убедиться в пригодности цоликлонов, донорской крови
4.	Материальное обеспечение: 1) цоликлон анти-А, В, АВ, Д СУПЕР; 2) исследуемая кровь; 3) маркированный планшет; 4) предметные стекла (стеклянные палочки); 5) пипетка для взятия крови; 6) перчатки; 7) часы; 8) регламентированный дезинфек-тант;

IV этап – Подготовка к проведению определению группы крови

№	Описание этапа	Техника проведения
1.	На поверхность керамической пластинки нанесите по одной капле (0,1 мл) цоликлона анти - А, анти - В и анти - АВ.
2.	Рядом с каждой каплей реагента нанесите маленькую (0,05-0,01 мл) каплю исследуемой крови.
3.	Смешайте каплю цоликлона с каплей крови индивидуальной чистой стеклянной палочкой.
	Реакция агглютинации развивается в течение первых 3 - 5 секунд при мягком покачивании пластинки.
	Результаты реакции учитываются через 2,5 - 3 минуты после смешивания капель.

V этап -Описание результата исследования

Оценка результатов:

1.При отсутствии агглютинации с двумя цоликлонами группа крови 0(I) - первая.

2.При наличии агглютинации с цоликлоном анти-А группа крови А(II) - вторая.

3.При наличии агглютинации с цоликлоном анти-В группа крови В(III) - третья.

4.При наличии агглютинации с двумя цоликлонами группа крови АВ(IV) - четвертая, что должно быть подтверждено агглютинацией с цоликлоном анти-АВ и отсутствием неспецифической агглютинации с изотоническим раствором натрия хлорида.

Учет результатов реакции агглютинации представлен в таблице:

Итоговая оценка формируется из суммы оценок 5 этапов, за каждый этап - 100 баллов, согласно таблицы1-2.

Таблица 1 – Оценка уровня знаний по ОСКЭ

Таблица 2 – Буквенно – балльно – рейтинговая оценка по дисциплине

Поиск по сайту: