Полезное увеличение

Таким образом, в оптическом микроскопе разрешаются объекты размером не менее 0,2 - 0,3 мкм. Для того, чтобы эти объекты были различимы также и глазом, увеличение К_м микроскопа должно быть не меньше величины, определяемой соотношением пределов разрешения Z_глаза и микроскопа Z_м: K_m = Z_гл / Z_м, подставляя в эту формулу значение Z, получим K_m = 2A Z_гл / l.

Z_глаза (на расстоянии наилучшего зрения) в интервале 2 - 4 равно от 140 до 280 мкм. Подставляя их, а также l= 0,555 мкм в формулу, находим интервал значений полезного увеличения микроскопа: 500А < K_м < 1000А. Эти увеличения называют полезными, т.к. при них глаз различает все элементы структуры объекта, которые разрешимы микроскопом. Подставляя числовую апертуру иммерсионной системы с маслом (n = 1,43) в формулу, получим следующее неравенство для полезных увеличений такого микроскопа: 700 < K_м < 1400.

Специальные приемы микроскопии:

измерение размеров малых объектов,

микропроекция, микрофотография,

метод фазового контраста,

метод темного поля (ультрамикроскопия).

1. Измерение размеров малых объектов.

Определение величины микроскопируемого предмета делается с помощью нанесенных на стеклянную пластинку масштабных шкал, называемых окулярным и объектным микрометрами.

Окулярный микрометр помещают между линзами окуляра так, чтобы его шкала находилась в плоскости промежуточного изображения, образуемого объективом, При этом в окуляр наблюдается изображение шкалы, совмещенное с изображением микроскопируемого предмета. Учитывая цену деления шкалы микрометра, можно определить размер этого изображения, даваемого объективом, а разделив полученные данные на известное увеличение объектива К_об - действительные размеры предмета.

Если цена деления окулярного микрометра неизвестна, то ее можно определить с помощью объектного микрометра с известной ценой деления (обычно 0,01 мм). Объектный микрометр помещается на место препарата и в окуляр наблюдается совмещенное изображение обеих шкал.

2. Микропроекция и микрофотография.

Мнимый характер изображения в микроскопе обусловлен тем, что промежуточное действительное изображение, образуемое объективом, располагается ближе переднего фокуса окуляра. Если это условие нарушить, например, перевернуть окуляр так, что изображение, которое дает объектив, окажется дальше фокусного расстояния окуляра, то последний будет давать действительное изображение, которое может быть спроецировано на экран или фотопленку. Способ наблюдения на экране действительного изображения предмета называется микропроекцией. Обычно при этом микроскоп ставят горизонтально и предмет освещают сильным источником света.

Фотографирование полученного таким образом действительного изображения называется микрофотографией. Обычно при этом употребляется специальная фотонасадка к микроскопу, которая представляет собой фотокамеру, надеваемую на окулярный конец тубуса микроскопа.

3. Метод фазового контраста.

Метод применяется для наблюдения мало контрастных объектов; он основан на использовании разности фаз, которая образуется при прохождении света через различные структуры исследуемого объекта.

4. Метод темного поля (ультрамикроскопия).