|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция |
Размораживание спермы
В и з о ц е р в и к а л ь н ы й способ. Данным способом можно осеменять как коров, так и телок. Используют влагалищное зеркало с осветителем и инструмент для введения спермы в зависимости от ее фасовки. Влагалищное зеркало стерилизуют кипячением или фламбированием и дают ему остыть. Прикрепляют к нему осветитель, протертый спиртовым тампоном, и кладут на обработанную подставку для инструментов. При введении спермы, замороженной в облицованных гранулах, используют зоошприц с удлинителем. Прежде чем собирать инструмент, сперму размораживают (табл. 9). Канистру надежно фиксируют с помощью опорных крючков, цепляют подвешивающее устройство за проволоку или веревочку, закрепленную на стенке, зажимают его хирургическим пинцетом с замком. Затем пинцеты опускают в горловину сосуда Дьюара на некоторое время для охлаждения и только после этого достают дозу спермы и размораживают ее на подготовленной водяной бане. Время с момента извлечения спермы из жидкого азота до перенесения ее на водяную баню не должно превышать 3 с. Увеличение промежутка времени ухудшает качество спермы. Размороженную сперму необходимо использовать в течение 10... 15 мин, поэтому рекомендуют ее размораживать только по одной дозе. Размороженная сперма должна находиться при комнатной температуре (не ниже 18°С). За указанный срок необходимо оценить качество спермы и ввести ее в половые пути самки, что возможно лишь в том случае, если на пункте искусственного осеменения соблюдены все требования температурного и санитарного режима. Вынув дозу спермы из водяной бани, протирают поверхность упаковки марлевой салфеткой, после чего исследуют спермии под микроскопом на подвижность. Затем подготавливают инструмент для осеменения. Упаковку с зоошприцем обрабатывают спиртом, извлекают корпус (фланец и толкатель при этом способе осеменения не используют), в который вставляют дозу спермы, и навинчивают корпус зоошприца на конец стерильного удлинителя, состоящего из трубчатого металлического корпуса и стержня с дисковым упором. Нажимая на упор стержня, продвигают облицованную гранулу к переднему концу корпуса зоошприца и через выходное отверстие прокалывают стерильной иглой оболочку спермодозы. Инструмент кладут на подставку. Увлажнив наружные поверхности браншей влагалищного зеркала теплым 2,9 %-м раствором цитрата натрия, вводят бранши во влагалище. Определяют состояние влагалищной части шейки матки и вставляют в цервикальный канал на глубину 5...6 см конец зоошприца. Плавно выдавливают сперму в цервикальный канал, после чего извлекают из половых органов удлинитель с корпусом зоошприца и влагалищное зеркало. Перед осеменением следующего животного стерилизуют влагалищное зеркало. С удлинителя снимают использованный корпус зоошприца и заменяют его другим, стерильным. Если сперма расфасована мелкими необлицованными гранулами, то для ее введения визоцервикальным способом используют влагалищное зеркало и шприц-катетер. К недостаткам шприца-катетера можно отнести следующее: на обработку инструмента затрачивается много времени, при его многократном использовании не исключена возможность переноса инфекционного начала и, наконец, после осеменения в шприце остается значительная часть дозы спермы (до 30 %). При визоцервикальном осеменении вместо шприца-катетера можно использовать одноразовую полистироловую пипетку, что намного повышает санитарный уровень процедуры осеменения. Пипетку соединяют при помощи переходной муфты (полистироловой пли резиновой) со стерильным шприцем (на 2 мл) или с полиэтиленовой ампулой, используемой при маноцервикальном осеменении. Целесообразно придерживаться следующего порядка работы: шприц простерилизовать кипячением и промыть 2,9 %-м раствором натрия цитрата, чтобы удалить остатки воды из инструмента; простерилизовать влагалищное зеркало. Взяв пакет с одноразовыми пипетками, протереть один из его углов спиртовым тампоном и надрезать стерильными ножницами или проколоть изнутри концом пипетки. В образовавшееся отверстие выдвинуть часть пипетки и соединить ее с муфтой, надетой на шприц; удерживая шприц рукой, извлечь пипетку из пакета и положить инструмент на обработанную подставку. Отверстие в пакете запаять на пламени, чтобы исключить возможность инфицирования пипеток, оставшихся в пакете. При работе с пипетками необходимо следить за тем, чтобы суммарный объем спермы и раствора натрия цитрата не превышал 1 мл. Если сперма быков заморожена мелкими гранулами по 0,2 мл, то их нужно размораживать в 0,8 мл стерильного 2,9 %-го раствора натрия цитрата. Указанный раствор часто бывает расфасован в ампулы по 1 мл, поэтому после вскрытия ампулы стерильной мерной пипеткой удаляют 0,2 мл (4...5 капель). Сперму в пипетку надо насасывать аккуратно, без пузырьков воздуха. В канале пипетки может находиться 1 мл жидкости. Нельзя допускать затекания спермы в шприц, иначе она останется в инструменте и не попадет в цервикальный канал. Отыскав с помощью влагалищного зеркала наружное отверстие цервикального канала, вводят в него как можно глубже конец пипетки. Затем, плавно нажимая на поршень шприца, выталкивают сперму из пипетки. Пипетку и влагалищное зеркало извлекают. Перед осеменением следующего животного стерилизуют влагалищное зеркало и заменяют пипетку. По окончании работы, использованные одноразовые пипетки сжигают. Чтобы улучшить результаты визоцервикального осеменения, рекомендуют использовать влагалищное зеркало, модифицированное Л. Овчинниковым (рис. 2.26) (срезан правый край верхней ветви зеркала). После введения зеркала инструмент со спермой продвигают в канал шейки матки. Повернув влагалищное зеркало срезом к верхней стенке влагалища, прижимают инструмент к слизистой оболочке в месте среза ветви зеркала и удерживают его в таком положении, после чего влагалищное зеркало извлекают. Через 20...30 с животное успокаивается, и после этого легким нажатием на поршень шприца сперму выталкивают из инструмента.
Рис. 23. Влагалищное зеркало для коров, модифицированное Л. Овчинниковым: правый край верхней ветви срезан впереди на 110...120 мм (1) и сзади на 55...60 мм (2) Маноцервикальный способ. Был предложен Ф. И. Осташко и В.А.Чирковым. При нем используют одноразовые инструменты. Указанным способом осеменяют только коров (телкам очень трудно ввести руку во влагалище, чтобы выполнить необходимые манипуляции при осеменении). При работе со спермой в облицованных гранулах используют зоошприц и трехпалую полиэтиленовую перчатку. Зоошприц находится в стерильной упаковке, которую вскрывают только перед использованием. Инструмент подготавливают к работе следующим образом: в заднюю часть корпуса с фланцем вставляют облицованную гранулу, досылают ее толкателем до упора и через выходное отверстие прокалывают стерильной иглой оболочку гранулы.
Надевают стерильную полиэтиленовую перчатку, смачивают ее поверхность стерильным 2,9 %- мраствором натрия цитрата и, введя руку в перчатке во влагалище, легко массируют шейку матки около 1 мин (рис. 24). Затем руку смещают назад и, не выводя ее из преддверия влагалища, другой рукой подают подготовленный зоошприц со спермодозой. Инструмент располагают внутри ладони, вдоль среднего пальца, и фиксируют его большим пальцем (рис.25). Руку возвращают к шейке матки и под контролем указательного пальца вставляют конец зоошприца в цервикальный канал. Массируя кончиками пальцев шейку матки, инструмент подталкивают ладонью до тех пор, пока он полностью не войдет в цервикальный канал. После этого заднюю часть инструмента поднимают на 2...3 см и, нажимая большим пальцем на упор толкателя, выдавливают сперму в цервикальный канал (рис. 26). После введения спермы зоошприц вынимают из цервикального канала, кладут на нижнюю стенку влагалища и массируют шейку матки в течение 1 мин. Затем осторожно выводят руку с инструментом. Держа зоошприц в руке, снимают перчатку, выворачивая ее, при этом инструмент остается внутри вывернутой перчатки. Использованные зоошприцы и перчатки складывают в ведро и сжигают после окончания работы. Чтобы избежать потери спермы, при работе с зоошприцем не следует надавливать толкателем на оболочку спермодозы в момент ее прокола и во время введения инструмента в половые органы коровы. При осеменении коров спермой, замороженной мелкими необлицованными гранулами, для маноцервикального способа необходимы полиэтиленовая ампула, катетер и трехпалая перчатка. Как и в предыдущем варианте, все инструменты на пункт искусственного осеменения животных поступают стерильными. Вскрыв упаковку, извлекают полиэтиленовую ампулу и стерильными ножницами срезают у нее конусовидный конец на расстоянии 4...5 мм. В образовавшееся отверстие вставляют конец катетера; ампулу сжимают и насасывают в инструмент дозу спермы. На руку надевают стерильную перчатку и далее поступают, как описано выше. Следует помнить, что сжимать ампулу надо с донышка и, выдавив из нее сперму, не разжимать (иначе жидкость начнет засасываться обратно). Не разжимая ампулу, инструмент выводят из цервикального канала. После осеменения использованные инструменты и перчатки уничтожают сжиганием. Цервикальное осеменение с ректальной фиксацией шейки матки. Этим способом можно осеменять коров и телок. Если сперма расфасована в облицованные гранулы, то используют те же инструменты, что и при визоцервикальном осеменении, при этом на катетер надевают стерильный чехол из пленки. Закрытый конец чехла находится впереди, задний фиксируют специальным замком (зажимом) на корпусе удлинителя. Надев на руку стерильную полиэтиленовую перчатку, раскрывают вульву и продвигают катетер по верхней стенке преддверия и влагалища на 2/3 его длины. Затем, потянув зажим чехла, разрывают его передний конец, освобождая корпус зоошприца. Руку в перчатке вводят в прямую кишку, а другой рукой удерживают инструмент. Освободив прямую кишку от каловых масс, массируют матку. Во время расслабления прямой кишки фиксируют шейку матки указательным и средним пальцами, а большим направляют конец пипетки в шейку матки. В цервикальный канал инструмент вводят осторожно на глубину до 7 см и, плавно нажимая на дисковый упор, выдавливают дозу спермы. Инструмент осторожно выводят из половых органов, а руку — из прямой кишки. Снимают перчатку, удаляют с удлинителя чехол и замок, отвинчивают корпус зоошприца и все перечисленные принадлежности утилизируют сжиганием. Если сперма заморожена мелкими гранулами, то для осеменения берут одноразовую полистироловую пипетку, переходную муфту, шприц на 2 мл (или полистироловую ампулу), длинную пятипалую перчатку. Порядок подготовки этих инструментов такой же, как и при визоцервикальном способе. Мелкие гранулы размораживают в 0,8 мл стерильного 2,9 %-го раствора натрия цитрата, общий объем полученной жидкости не должен превышать 1 мл.
Пипетку в канал шейки матки вводят так же, как и зоошприц с удлинителем (рис. 27). Продвинув конец пипетки максимально глубоко в цервикальный канал, нажимают на поршень, выталкивая сперму. При использовании пипетки с полистироловой ампулой, чтобы вытолкнуть сперму из пипетки, необходимо сжать ампулу и не разжимать ее до выведения конца пипетки из шейки матки (чтобы предотвратить обратное всасывание содержимого из цервикального канала). Завершив работу, одноразовые пипетки и перчатки сжигают. При осеменении спермой, расфасованной в соломинки (пайетты), соблюдают следующий порядок работы. Уголок полиэтиленового мешка, где лежат стерильные защитные чехлы, протирают спиртовым тампоном и отрезают ножницами. Отверстие делают таким, чтобы через него можно было взять один чехол, конец которого выдвигают из пакета на 20...30 мм, при этом остальная часть чехла остается стерильной. Сделанный разрез лучше запаять, чтобы восстановить герметичность. В крайнем случае, можно загнуть края и зафиксировать их скрепкой или каким-либо зажимом. Соломинку помещают в камеру осеменительного инструмента, отрезают герметизирующую пробку ножницами и сразу же надевают стерильный защитный чехол на инструмент, который вводят в шейку матки с соблюдением тех же правил, что и при введении пипетки или удлинителя с корпусом зоошприца. В настоящее время для искусственного осеменения коров и телок в основном используются современные приборы (рис.28), которые имеют ряд преимуществ.
Рис. 28. Приборы для осеменения коров с использованием пайетт производства Минитюб: QUICKLOCK 2000 и QUICKLOCK classic в комплекте со стерильными чехлами
Овец и коз осеменяют визоцервикальным или влагалищным способом. Для визоцервикального осеменения влагалищные зеркала кипятят или фламбируют. Шприц-катетер или шприц-полуавтомат стерилизуют кипячением в дистиллированной воде, обернув поршни и цилиндры одним кусочком марли. Можно обрабатывать спиртом. Для этого ставят в ряд несколько баночек с притертыми пробками; в 1-й лежат тампоны, пропитанные спиртом, во 2-й налит спирт, в остальных находится стерильный изотонический раствор. Поверхность инструмента сначала протирают спиртовым тампоном от переднего конца к цилиндру, затем набирают 70%-й спирт и, перемещая поршень шприца, обрабатывают всю внутреннюю поверхность катетера и цилиндра. Удалив спирт, его остатки вымывают изотоническим раствором натрия хлорида из двух разных баночек, по 3 раза из каждой. После этих процедур в шприц-катетер или шприц-полуавтомат можно набирать сперму. За рубежом для осеменения овец свежеполученной, охлажденной и замороженной спермой используют одноразовые инструменты. Овцу фиксируют в станке. Хвост отводят в сторону и удерживают. Наружную поверхность влагалищного зеркала смачивают изотоническим раствором натрия хлорида. Одной рукой расширяют вульву, другой вводят зеркало в косом направлении (снизу вверх) и, раздвинув его бранши, находят отверстие шейки матки. Вводят в цервикальный канал конец шприца-катетера на глубину 1...2 см и, надавливая на поршень, выталкивают дозу спермы (рис. 29). В зависимости от качества и способа хранения спермы объем дозы может колебаться от 0,05 до 0,2 мл. Минимальную дозу используют в том случае, если сперма неразбавленная или сохраняет после разбавления высокую концентрацию спермиев. Рис. 29. Правильное положение рук и инструментов при искусственном осеменении овцы: 1 — шприц; 2 — влагалищное зеркало
Для оплодотворения в половые органы овцы нужно ввести не менее 80 млн подвижных спермиев. Объем вводимой дозы определяют исходя из степени разбавления спермы: при соотношении 1: 1 доза составляет 0,1 мл, 1:2 —0,15 и 1:3 —0,2 мл. Подвижность спермиев как в свежеполученной, так и в сохраненной при 2...50 С сперме должна быть не менее 8 баллов. Размороженную сперму барана вводят по 0,2 мл при подвижности спермиев не ниже 4 баллов. Влагалищный способ. Применяют у ярок, так как им не удается ввести влагалищное зеркало. Сперму вводят с помощью шприца-катетера, который осторожно продвигают по верхней стенке влагалища до упора в его свод. Затем катетер смещают на несколько миллиметров назад, сперму выталкивают из инструмента. При влагалищном способе осеменения дозу спермы увеличивают в 2 раза. Так как у шприца-катетера для овец тонкий конец, кнему делают пластмассовые насадки. Из переднего конца насадки катетер выступает лишь на 1...2 мм. Насадка значительно облегчает введение спермы во влагалище, но усложняет обеззараживание инструмента. При осеменении овец в силу сезонности и массовости чаще, чем при осеменении самок других видов, создаются предпосылки для различных нарушений санитарных правил. Кроме того, только овец разрешается осеменять одним и тем же инструментом, протирая его спиртовым тампоном перед каждой процедурой. Свиней осеменяют фракционным или нефракционным способом.
Фракционный способ. Вначале вводят сперму неразбавленную или разбавленную незначительно (первая фракция), затем заполнитель (вторая фракция), после чего в матку накачивают воздух одним-двумя баллонами Ричардсона (третья фракция). Такой способ обеспечивает максимальное продвижение спермиев к яйцепроводам. Для фракционного осеменения используют термос-прибор или универсальный зонд УЗК-5 (рис. 30). Особенность зонда — на свободном конце сделана головка из мягкой резины; головка плотно прилегает к стенкам канала шейки матки и закрывает ее просвет Нефракционный способ. Для осеменения используют очень простой и удобный инструмент ПОС-5 (рис.31), который состоит из полиэтиленового градуированного флакона с пробкой и катетера, на переднем конце которого оливкообразное расширение, на заднем — соединительная муфта. Рис. 31. Прибор ПОС-5 для искусственного осеменения свиней: 1 — полиэтиленовые градуированные флаконы на 120мл; 2 — навинчивающийся полиэтиленовый колпачок; 3 — соединительная муфта; 4 — полиэтиленовый катетер длиной 60 см, наружным диаметром 7 мм; 5 — оливкообразное расширение с максимальным наружным диаметром 14 мм
Флакон прибора ПОС-5 и пробку к нему стерилизуют кипячением в дистиллированной воде 15...20 мин и промывают стерильным изотоническим раствором натрия хлорида или средой для разбавления спермы, чтобы удалить остатки воды. Флакон заполняют разбавленной спермой и закрывают пробкой. Катетеры кипятят 15...20 мин в дистиллированной воде в матерчатых мешках, а затем, не вынимая из мешков, просушивают. В случае необходимости, чтобы удалить остатки воды, катетеры промывают из спринцовок или шприца стерильным изотоническим раствором натрия хлорида. Сперму подогревают на водяной бане при температуре 35°С и доставляют к месту осеменения в специальном термосе. У свиноматки (в состоянии охоты) вульву обрабатывают ватным тампоном, обильно смоченным раствором фурацилина (1:5000), а затем насухо вытирают тампоном или салфеткой. К флакону со спермой привинчивают стерильный катетер. Осторожно вводят его во влагалище свиньи до упора в свод. Флакон при этом остается опущенным вниз. После введения катетера флакон переворачивают вверх дном, поднимают выше спины свиноматки и держат в таком положении 5...7 мин. Сперма поступает самотеком и засасывается в матку, чему способствуют ее антиперистальтические сокращения. В отдельных случаях флакон слегка сдавливают. Если же сперма начинает вытекать наружу, давление на флакон прекращают до очередного расслабления матки. Завершив осеменение, катетер осторожно вынимают и кратковременно массируют вульву. ПОС-5 после использования промывают 2...3%-м раствором натрия гидрокарбоната, прополаскивают водопроводной, а затем дистиллированной водой. Для осеменения используют сперму с подвижностью спермиев не менее 6 баллов, в дозе 80... 100 мл взрослым и 70...80мл молодым свиноматкам. Свиноматок осеменяют в специальной клетке или непосредственно в станках. Летом клетку помещают в раскол с навесом. После осеменения каждую свиноматку необходимо в течение 24...30 ч держать в отдельных станках, чтобы не допустить вытекания из матки разбавителя и спермы при прыжках (что наблюдают при содержании свинок в общих станках).
Рис. 32. Катетеры для осеменения свиноматок производства компании Minitϋbe
Для осеменения свиней нефракционным способом можно использовать также одноразовые инструменты зарубежного производства: цветные флаконы на 100 мл и цервикальные и трансцервикальные катетеры самой разной модели (рис.32.) Кобыл осеменяют визоцервикальным или маноцервикальным способом. При визоцервикальном способе обеззараживают влагалищное зеркало по общим правилам. Для введения спермы используют твердый эбонитовый катетер (конструкции Института коневодства), соединенный резиновой муфтой со шприцем Люэра на 50 мл (рис. 33, А). Все инструменты стерилизуют кипячением или, как исключение, 70%-м спиртом.
Рис.33. Приборы для искусственного осеменения кобыл: А - твердый эбонитовый катетер, присоединенный при помощи переходной муфты к стеклянному шприцу (а) и влагалищное зеркало (б); Б - Ампула Растяпана (а) с гибким резиновым катетером Иванова (б); В - набор одноразовых инструментов для маноутерального осеменения: шприц на 30 мл, полистироловая пипетка и пятипалая гинекологическая перчатка Кобылу заводят в станок, задние конечности фиксируют случной шлейкой или вожжами, хвост забинтовывают от корня до середины репицы. Вульву обмывают кипяченой водой и раствором фурацилина (1:5000). Кожу высушивают салфетками или туалетной бумагой. Чтобы удалить остатки воды или спирта, обеззараженный инструмент промывают стерильным изотоническим раствором натрия хлорида или специальной средой. Набирают 20... 40 мл спермы, предварительно подогретой до 30...35 0С (активность спермиев не менее 5 баллов). При использовании криоконсервированной спермы алюминиевый пакет объемом 25 мл (или два – объемом по 13 мл) вскрывают после размораживания. Активность спермиев вразмороженной сперме должна быть не ниже 2,5 балла. Рис. 34. Техника осеменения кобыл визоутеральным способом: 1- влагалищное зеркало; 2 - стеклянный шприц; 3- твердый эбонитовый катетер с переходной муфтой
Влагалищное зеркало увлажняют изотоническим раствором натрия хлорида, вводят в половые пути и находят шейку матки. Вцервикальный канал продвигают конец катетера на глубину 10...12 см, после чего вводят сперму. Глубина введения очень важна, так как сперма обязательно должна поступать в матку (рис. 34). Рис. 35. Маноцервикальное осеменение кобылы с использованием резинового катетера И.И. Иванова (1) и шприца (2) При маноутеральном осеменении используют мягкий резиновый катетер, шприц или ампулу (рис.35). Все инструменты стерилизуют кипячением, промывают изотоническим раствором натрия хлорида. Собранный из обеззараженных инструментов комплект заполняют теплой спермой (если работают со шприцем). При использовании ампулы Растяпина ее присоединяют к катетеру. На руку надевают одноразовую стерильную полиэтиленовую перчатку или, тщательно вымыв руку, кожу протирают спиртовым тампоном. Перчатку или кожу смачивают стерильным изотоническим раствором натрия хлорида и, захватив пальцами катетер, руку вводят руку во влагалище (рис. 36). Найдя шейку матки, осторожно продвигают в цервикальный канал эластичный катетер как можно глубже и вводят сперму в тех же дозах, что и при визоцервикальном осеменении. Рис.36. Техника осеменения лошадей маноутеральным способом (R.H. Foot) В настоящее время в коневодстве маноутеральный способ осеменения является основным. Для осеменения кобыл применяют одноразовые стерильные инструменты (рис.33, В). Набор для осеменения состоит из полиэтиленовой перчатки, полистеролового шприца объемом 30 мл, полистиролового катетера (длиной 63…65 см) с адаптером. В шприц набирают дозу спермы и оценивают ее качество. Осеменатор должен быть соответствующим образом экипирован - в халате, фартуке, а его правая (активная) рука до плеча – в полиэтиленовой гинекологической перчатке. Руку в перчатке, обильно смоченной 1%-м стерильным раствором натрия бикарбоната, вместе с катетером для осеменения вводят во влагалище кобылы. Под контролем указательного пальца конец катетера через цервикальный канал направляют в тело матки (рис.36). Затем руку извлекают, к катетеру присоединяют шприц и нажатием на поршень вводят сперму в полость матки. Поиск по сайту: |
Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.012 сек.) |