 |
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция
Определение желатиназы по методу Ле-Минора
Принцип. Метод основан на способности протеолитического фермента желатиназы гидролизовать желатину до водорастворимых соединений.
Реактивы: засвеченная и проявленная фото- и кинопленки, калий фосфорнокислый однозамещенный 1/15 моль/л, натрий фосфорнокислый двузамещенный 1/15 моль/л (высушенный на воздухе в течение 12-14 дней).
Приготовление растворов:
Раствор А. Растворяют 9,078 г КН2РО4 в 1 л дистиллированной воды.
Раствор Б. Растворяют 11,876 г Na2НРО4 в 1 л дистиллированной воды.
Для получения фосфатного буфера, 1/15 моль/л, рН 7,1 берут 33,4 мл раствора А и 66,6 мл раствора Б и смешивают.
Ход исследований.
Используют фото- и кинопленку, предварительно засвеченную, проявленную и фиксированную. Пленку нарезают на квадраты размером 5х5 мм, стерилизуют в чашках Петри в автоклаве при 0,5 атм. (115 град. С) 30 минут (для предупреждения слипания пленок их помещают между прокладками фильтровальной бумаги). Стерильную пленку помещают в пробирки со взвесью 18-20 часовой агаровой культуры микробов в 1/15 моль/л растворе фосфатного буфера рН 7,1. Просветление 3/4 или всей поверхности пленки считается положительным результатом. Срок наблюдений - 1-5 дней.
ГЛАВА 17
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae.
Семейство кишечных энтеробактерий (Enterobacteriaceae) объединяет грамотрицательные анаэробные и факультативно анаэробные бактерии, не образующие спор, капсульные и бескапсульные, подвижные или неподвижные, хорошо растущие на обычных питательных средах.
Облигатным признаком его представителей является ферментация глюкозы с образованием кислых или кислых и газообразных продуктов. Отношение к другим углеводам может у энтеробактерий варьировать.
Для энтеробактерий характерна способность восстанавливать нитраты, проявлять каталазную активность. Энтеробактерии не имеют фермента цитохромоксидазы.
Для дифференциации энтеробактерий от других семейств грамотрицательных бактерий основными тестами являются: тест на цитохромоксидазу, восстановление нитратов в нитриты, тест на каталазную активность и OF-тест (окислительно - ферментативный тест Хью-Лейфсона) для определения биохимических реакций с углеводами.
Наибольшее признание нашла в настоящее время классификация семейства Enterobacteriaceae, представленная в "Кратком определителе бактерий Берги", М., 1980 г. (см. таблицу 12).
Таблица 12
Классификация семейства Enterobacteriaceae
(Определитель бактерий Берджи, 1997 г.)
| Род | Вид | Род | Вид |
| Escherichia | E.coli | Salmonella | S.choleraesuis |
| E.adecarboxylata | S.hischfeldii | ||
| E.blattae | S.typhi | ||
| E.hermanii | S.paratyphi | ||
| E.vulneris | S.schottmuelleri | ||
| E.fergusonii | S.typhimurium | ||
| Edwardsiella | E.tarda | S.enteritidis | |
| E.istaluri | S.gallinarum | ||
| E. hoshinae | S.salamae | ||
| Citrobacter | C.freundii | S.arizonae | |
| C.diversus | S.houtenae | ||
| C.amalonaticus | S.bongori | ||
| Shigella | S.dysenteriae | S.ficaria | |
| S.flexneri | Proteus | P.vulgaris | |
| S.boydii | P.mirabilis | ||
| S.sonnei | P.myxofaciens | ||
| Klebsiella | K. pneumoniae subspation (далее- subsp.) pneumoniae | P.pennori | |
| Providencia | P.alcalifaciens | ||
| K. pneumoniae subsp. ozaenae | P.stuartii | ||
| P.rettgeri | |||
| K. pneumoniae subsp. rhinoscleromatis | P.rustigianii | ||
| P.heimbachae | |||
| K.oxitoca | Morganella | M.morganii | |
| K.planticola | Yersinia | Y.pseudotuberculosis | |
| K.terrigena | Y.pestis | ||
| Enterobacter | E.cloacae | Y.enterocolitica | |
| E.aerogenes | Y.rohdei | ||
| E.taylorae | Y.mollaretii | ||
| E.gergoviae | Y.ruckeri | ||
| E.dissolvens | Y.intermedia | ||
| E.amnigenus | Y.frederiksenii | ||
| E.hormaechei | Y.bercovieri | ||
| E.sacazaki | Y.kristenii | ||
| E.intermedium | Y.aldovae | ||
| E.asburiae | Rahnella | R.aquatilis | |
| Hafnia | H.alvei | Xenorhabdus | X.nematophilus |
| Serratia | S.marcescens | X.luminescens | |
| S.liquefaciens | Cedecea | C.davisae | |
| S.rubidaea | C.lapagei | ||
| S.plymutica | Tatumella | T.ptyseos | |
| S.proteamaculans | Arsenophonus | A.nasoniae | |
| S.odorifera | Budvicia | B.agrestis | |
| S.fonticola | Ewingella | E.americana | |
| Erwinia | E.amylovora | Leclercia | L.adecarboxylata |
| E.ananas | Leminorella | L.grimontii | |
| E.salicis | L.richardii | ||
| E.casticida | Moellerella | M.wisconsensis | |
| E.tracheiphila | Pantoea | P.agglomeranc | |
| E.chrysantemii | P.dispersa | ||
| E.nigrifluens | Pragia | P.fontium | |
| E.quercina | Yokenella | Y.regensburgei | |
| E.rubrifaciens | |||
| E.stewartii | |||
| E.persicinas | |||
| E.uredovora | |||
| E.psidii | |||
| E.cypripedii | |||
| E.rhapontici | |||
| E.caratovora | |||
| E.mallotivora | |||
| Obssumbac- terium | O.proteus | ||
| Kluyvera | K.ascorbata | ||
| K.creyoerescens |
В отличие от прежних представлений теперь считают, что практически любой представитель семейства энтеробактерий может быть причастен, при определенных обстоятельствах, к возникновению инфекционного процесса различной локализации.
Поиск по сайту: