Размеры и основные формы бактерий

Медицинская микробиология, её задачи, связь с другими медицинскими дисциплинами.

Медицинская микробиология-это раздел медицины изучающий воздействие патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и вирусов на организм человека, методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и этиотропного лечения заболеваний вызванными ими.

Задачи: диагностика заболеваний микробной природы, микробиологический контроль объектов внешней среды, разработка препаратов для спец.профилактики инфекционных заболеваний.

Вопросы врачебной этики и деонтологии в медицинской микробиологии.

3. Основные методы микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.

1. Микроскопический метод, который в зависимости от объекта исследования под разделяется на бактериоскопический и вирусоскопический. Бактериоскопический метод является:

— ведущим для диагностики первичного сифилиса, менингококковой инфекции (посмертно), ангины Симановского-Плаута-Венсана, возвратного тифа, лепры и др.;

— обязательным ориентировочным - при диагностике острой мужской гонореи, ту­беркулеза, лептоспироза, менингококковой инфекции (прижизненно). Вирусоскопический метод используется при экспрессной диагностике: гриппа и

парагриппа - обнаружение фуксинофильных внутрицитоплазматических включений, бешенства - обнаружение включений Бабеша-Негри, цитомегаловирусной инфекции

— обнаружение гигантских клеток, напоминающих "совиный глаз".

2 Микробиологический метод, который в зависимости от объекта исследования подразделяется на:

бактериологический метод заключается в культивировании бактерий на соответ­ствующих питательных средах с последующей их идентификацией. Этот метод ис­пользуется для диагностики кишечных заболеваний, таких как холера, брюшной тиф, дизентерия, а также при дифтерии, туберкулезе и др.;

вирус ологический метод заключается в культивировании вирусов в курином эм­брионе (вирусы гриппа), в культуре клеток (аденовирусы, полиовирусы), в организ­ме животных (вирусы клещевого энцефалита, бешенства) с последующей их иден­тификацией;

микологический метод заключается в культивировании дрожжеподобных и плес­невых грибов на соответствующих питательных средах с последующей их иденти­фикацией;

3. Иммунологический метод подразделяется на:

серологический метод, который заключается в определении в сыворотке крови больных специфических высокоспециализированных белков - антител к соответствующему возбудителю с помощью различных серологических реакций. Используется для диагностики большинства инфекционных заболеваний бактериальной и ви­русной природы. Например, реакция Видаля при брюшном тифе, реакция Райта при бруцеллезе, реакция Вассермана при сифилисе, иммуноферментный метод при ви­русных гепатитах, ВИЧ-инфекции;

аллергологический метод, который заключается в определении состояния повы­шенной чувствительности макроорганизма к каким-либо аллергенам, в том числе и к микробным;

Для диагностики инфекционных заболеваний используют следующие аллергиче­ские пробы:

a)при туберкулезе - проба Манту с туберкулином,

b)при бруцеллезе - проба Бюрне с бруцеллином,

c)при туляремии - проба с тулярином,

d)при сибирской язве - проба с антраксином,

e)при лепре - проба Митсудо с лепромином.

4 Биологический метод используется для выделения или идентификации возбудителей путем заражения лабораторных животных. Например, при диагностике туберкулеза (особенно внелегочных форм), ботулизма, бешенства. Кроме того, этот метод используют для создания экспериментальных моделей инфекционных заболеваний

5 Генетический метод - полимеразная цепная реакция (ПЦР). С помощью ПНР в исследуемом материале определяют не собственно микроорганизмы, а только спе­цифический для каждого вида возбудителя фрагмент ДНК его генома. Этот фраг­мент является матрицей для многократного увеличения его копий (амплификация), что впоследствии дает возможность визуально учесть реакцию. Для проведения ПЦР необходимы ДНК-полимераза и специфический праймер. Праймеры - это син­тетические олигонуклеотиды, комплементарные фрагменту ДНК определяемого микроорганизма. ПЦР - чрезвычайно чувствительный метод, т.к. позволяет опреде­лить небольшое количество молекул ДНК в исследуемом материале. В настоящее время этот метод широко применяется для диагностики ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов, герпетической, хламидийной, гонококковой инфекций и др.

Размеры и основные формы бактерий.

Размеры и основные формы бактерий. Латинские названия.
По размеру бактерии подразделяются на:

а) мелкие (1-3 мкм). Например:

- Brucella melitensis - возбудитель бруцеллеза,

- Francisella tularensis - возбудитель туляремии,

- Bordetella pertusis - возбудитель коклюша.

б) средние (3-6 мкм). Например:

- Escherichia coli (кишечная палочка) - нормальный обитатель толстого кишечника человека,

- Klebsiella pneumoniae - вызывает пневмонию, сепсис, урологические инфекции у ослабленных людей,

- Salmonella typhi - возбудитель брюшного тифа.

в) крупные (более 6 мкм). Например:

- Bacillus anthracis - возбудитель сибирской язвы,

- Clostridium perfringens - возбудитель газовой гангрены,

- Clostridium tetani - возбудитель столбняка,

- Clostridium botulinum - возбудитель ботулизма.

Существуют три основные формы бактерий:

1. Шаровидная (сферическая). Бактерии, имеющие такую форму, называются кокками.

2. Палочковидная.

3. Извитая.

I. В зависимости от плоскости деления и взаиморасположения в мазке кокки под
разделяются на:

а) микрококки - (лат. micros - малый) делятся в одной плоскости, в мазке располагаются одиночно;

б) диплококки - или парные кокки (греч. diplos - двойной). Делятся в одной плоскости, в мазке располагаются попарно. Диплококки могут иметь:

1. бобовидную форму. К ним относятся:

-Neisseria gonorrhoeae - возбудитель гонореи,

-Neisseria meningitidis - возбудитель менингококковой инфекции.

2. ланцетовидную форму:

- Streptococcus pneumoniae - возбудитель крупозной пневмонии,

в) тетракокки - (греч. terra - четыре) располагаются в мазке по четыре, т.к. делятся в
2-х взаимно-перпендикулярных плоскостях,

г) сарцины (греч. sarcio - связываю). Делятся в 3-х взаимно-перпендикулярных
плоскостях. Располагаются пакетами по 8 -16 клеток. Например:

- Sarcina ventriculi - нормальный обитатель желудка.

Тетракокки и сарцины, как правило, не вызывают заболеваний у человека.

д) стрептококки - (греч. streptos - цепочка), располагаются в мазке цепочкой, т.к. де-
лятся во многих параллельных плоскостях. Например:

- Streptococcus pyogenes - возбудитель скарлатины, рожи, ревматизма и др.

- Enterococcus faecalis (энтерококки) - нормальный обитатель толстого кишечни­ка.

- Peptostreptococcus anaerobius - является нормальным симбионтом организма че­ловека, но может быть причастен к анаэробной инфекции.

е) стафилококки или гроздьевидные кокки (греч. staphylos - виноградная гроздь).
Делятся во многих неупорядоченных плоскостях. В мазке располагаются беспорядочно, скоплениями, напоминающими виноградную гроздь. Например:

- Staphylococcus aureus - причастен к гнойно-септической патологии;

- Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus - нормальные обитате­ли кожи и слизистых оболочек.

II. Палочковидные микроорганизмы подразделяются на неспоробразующие. или собственно бактерии, и спорообразующие. или бациллы.

Примеры собственно бактерий:

-Pseudomonas aeruginosa - синегнойная палочка,

-Escherichia coli - кишечная палочка.

Все спорообразующие палочковидные бактерии по размеру и расположению споры в бактериальной клетке делятся на:

а) собственно бациллы - микроорганизмы, у которых спора располагается в центре и
диаметр споры меньше диаметра клетки, поэтому она не деформирует клеточную
стенку. Например:

- Bacillus anthracis;

б) клостридии (лат. closter - веретено) - микроорганизмы, у которых спора распола-
гается центрально или субтерминально и диаметр споры превышает диаметр
клетки, что придает клетке внешнее сходство с веретеном. Например:

- Clostridium perfringens;

в) плектридии (лат. plectra - барабанная палочка) - микроорганизмы, у которых спо­ра располагается терминально и превышает диаметр клетки, что придает клетке внешнее сходство с барабанной палочкой. Например:

- Clostridium tetani.

III. Извитые подразделяются на;

а) вибрионы (греч. vibrio - извиваюсь) - слегка изогнутые палочки, при микроскопии
имеют вид запятой. Например:

- Vibrio cholerae - возбудитель холеры;

б) спириллы (греч. speira - завиток) - бактерии имеющие изгибы, равные одному или
двум оборотам спирали. При микроскопии имеют форму латинской буквы S или
крыльев летящей чайки. Например:

-Spirillum minor - вызывает заболевание содоку (болезнь укуса крыс);

-Campylobacter coli, Campylobacter jejuni - вызывают энтероколиты (кишечный кампилобактериоз);

-Helicobacter pylori - нормальный обитатель желудка, причастен к возникнове­нию хронического гастрита, способствует развитию язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки, рака желудка;

в) спирохеты - (греч. speira - завиток, chaite - волосы) имеют штопорообразную
форму. Отличаются друг от друга по характеру первичных и вторичных завитков,
а также по другим морфологическим признакам. Первичные завитки - изгибы са-
мой цитоплазмы. Вторичные завитки образуются при движении спирохет. Среди
спирохет медицинское значение имеют 3 рода:

1. трепонемы - имеют мелкие равномерные первичные завитки. К ним относятся.

- Treponema pallidum - возбудитель сифилиса,

- Treponema vincentii - в ассоциации с Fusobacterium nucleatum (веретеновидные палочки) вызывает язвенно-некротическую ангину Симановского-Плаута-Венсана,

2. боррелии - имеют крупные неравномерные первичные завитки и заостренные
концы. К ним относятся:

- Borrelia recurrentis - возбудитель эпидемического возвратного тифа,

- Borrelia duttoni - возбудитель эндемического возвратного тифа,

- Borrelia burgdorferi - возбудитель болезни Лайма;

3. лептоспиры - имеют мелкие тесно прилегающие друг к другу первичные завитки,
крючкообразно загнутые концы и крупные вторичные завитки, придающие микро-
бам S или С-образную форму. Например:

- Leptospira interrogans - возбудитель лептоспироза.

5. Морфология плесневых и дрожжеподобных грибов. Роль в патологии. Морфология плесневых и дрожжеподобных грибов. Дрожжеподобные грибырода Candida. Роль в патологии.

Микроскопические грибы относятся к эукариотическим микроорганизмам и имеют оформленное ядро с ядерной оболочкой и ядрышками, митохондрии, аппарат Гольджи. Микроскопические плесневые грибы представляют собой скопления тон­ких ветвящихся нитей разнообразной длины (гифы), формирующие мицелий. Разли­чают субстратный мицелий, погруженный в питательную среду, и воздушный, рас­тущий на поверхности среды. Грибы размножаются при помощи спорообразования. Различают следующие виды плесневых грибов:

1.мукоровая (одноклеточная) плесень (Mucor), у которой на конце плодоно­сящих гиф располагаются шарообразные расширения (спорангии), напол­ненные эндоспорами;

2.леечная (многоклеточная) плесень (Aspergillus), у которой на концах пло­доносящих гиф имеются небольшие клетки (стеригмы) на которых распо­лагаются цепочки конидий (эндоспоры), что напоминает льющуюся из лей­ки воду;

3.кистевики (Penicillium), многоклеточные грибы, у которых концы плодоно­сящих гиф с эндоспорами имеют вид кисточек.

Плесневые грибы - сапрофиты, широко распространенные во внешней среде. Ис­пользуются как продуценты антибиотиков. Могут вызывать заболевания только у ослабленных людей.

Дрожжеподобные грибы отличаются от истинных дрожжей отсутствием спорообразования. Это крупные округлой или овальной формы клетки Размножаются почкованием. Некоторые представители дрожжеподобных грибов являются возбу­дителями микозов у человека и животных.

Дрожжеподобные грибы рода Candida - условно-патогенные микроорганизмы, широко распространенные в окружающей среде, входят в состав факультативной микрофлоры человеческого организма. При снижении резистентности макроорга­низма кандиды могут вызывать заболевания кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, называемые кандидозами (кандидомикозами).

Актиномицеты, Морфология. Роль в патологии.

Актиномицеты - ветвящиеся, грамположительные бактерии. Структурной единицей актиномицетов, как и плесневых грибов, являются гифы. Актиномицеты могут делиться путем фрагментации мицелия на палочковидные и сферические клетки. На воздушных гифах актиномицетов могут образовываться споры, служащие для размножения. Сапрофитические формы актиномицетов широко распространены в почве, участвуя в круговороте веществ в природе, многие из них явля ются продуцентами антибиотиков. Патогенные актиномицеты вызывают заболева­ние актиномикоз.В пораженных тканях формируют особые образования - друзы, со­стоящие из плотно переплетенных нитей в виде лучей, отходящих от центра и за­канчивающихся колбовидными утолщениями.

6. Техника приготовления и окрашивания бактериологического препарата. Принцип простого и сложного методов окраски.

Этапы приготовления мазка:

А. Обезжиривание предметного стекла сухим мылом.

Б. Собственно приготовление мазка: а) из бульонной культуры: - прокалить петлю, над спиртовкой открыть пробку пробирки, обжечь края про­бирки, набрать каплю культуры петлей. Опять обжечь края пробирки и закрыть пробкой. Пробирку поставить в штатив, нанести каплю культуры на предметное стекло и распределить параллельными движениями петли (диаметр мазка -0,5-1 см), прожечь петлю;

2. Техника приготовления и окрашивания бактериологического препарата:
1) Собственно приготовление мазка:

а) с жидкой питательной среды

- на предварительно обезжиренное стекло нанести каплю культуры петлей и распределить ее параллельными движениями;

б) с плотной питательной среды

- вначале на обезжиренное стекло нанести каплю физиологического раствора, затем внести в эту каплю петлей небольшое количество агаровой культуры и также распределить параллельными движениями.

2). Высушивание мазка на воздухе или высоко над пламенем спиртовки. 3). Фиксация мазка:

а) жаром, над пламенем спиртовки - для изучения морфологии бактерий и дифференциации их при окраске сложными методами;

б) химическим методом - для изучения деталей внутреннего строения и для
фиксации мазков крови. В качестве химических фиксаторов чаще используют
этиловый и метиловый спирт, а также смесь Никифорова (смесь этилового спирта и эфира в соотношении 1:1)

Назначение фиксации:

а) убить микроорганизмы;

б) прикрепить их к предметному стеклу;

в) улучшить их прокрашивание.

4). Окраска препаратов простым или сложным методом.

Принципы простого и сложного методов окраски препаратов, назначение.

Простой метод позволяет изучать форму, размеры и расположение бактерий. При простом методе окраски используют только один краситель, чаще фуксин Пфейффера или метиленовый синий.

Принципиальный рецепт простого водно-спиртового красителя: 1 часть красителя +10 частей 96° этилового спирта +100 частей дистиллированной воды.

Сложные методы позволяют дифференцировать микроорганизмы (окраска по Граму, Цилю-Нильсену) или изучать отдельные структуры клеток (окраска по Бур-ри-Гинсу, Нейссеру, Романовскому-Гимзе), Сложный метод окраски включает ис­пользование двух и более красителей.

7. Окраска по Граму. Механизм окраски. Примеры грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Окраска по Граму (в модификации Синева):

а) на фиксированный мазок накладывают фильтровальную бумагу, пропитанную
генциан-фиолетовым, смачивают водой, окрашивают 2 минуты;

б) снимают бумагу и наносят на мазок раствор Люголя на 1 минуту, затем краситель
сливают;

в) обесцвечивают мазок 96° спиртом 10-15 секунд (до исчезновения сине-
фиолетовых струек);

г) промывают мазок водой;

д) докрашивают фуксином Пфейффера 30 секунд;

е) промывают мазок водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют.

По отношению к этой окраске все бактерии подразделяются на грамположительные (окрашиваются в сине-фиолетовый цвет) и грамотрицательные (окрашиваются в розово-красный цвет).

К грамположительным микроорганизмам относятся все кокки, кроме нейссерий, и палочковидные бациллы. К грамотрицательньш - нейссерии, неспорообразующие бактерии, вибрионы и спириллы.

Механизм окраски по Граму.

В основе дифференциации микроорганизмов на грамположителъные и грамотрицательные лежат отличия в строении клеточной стенки.

Основой клеточной стенки бактерий является пептидогликан, обусловливаю­щий ее прочность и ригидность. У грамположительных бактерий пептидогликан многослоен, толщиной до 500 А и с ним связаны тейхоевые кислоты. У грамотрицательных бактерий толщина пептидогликана не более 150 А, нет тейхоевых. кислот, но есть наружная мембрана, которая в основном содержит липополисахариды.

Сущность механизма окраски по Граму заключается в следующем: вначале препарат окрашивают генциан-фиолетовым, а затем раствором Люголя, в результате чего образуется комплекс генциан-фиолетовый + йод, и все клетки окра­шиваются в фиолетовый цвет. Последующая обработка спиртом дифференцирует два типа бактерий. У грамположительных бактерий образовавшийся комплекс не вымывается спиртом, что обусловлено прочной связью с тейхоевыми кислотами, плотностью и многослойностью пептидогликана и при докрашивании фуксином Пфейффера они сохраняют фиолетовую окраску. У грамотрицательных бактерий, комплекс генциан-фиолетовый + йод вымывается спиртом, т.к. нет тейхоевых кислот и тонкий слой пептидогликана, поэтому обесцвеченные микробные клетки при бкраске фуксином Пфейффера приобретают красный цвет.

Поиск по сайту: