Характеристика свойств микробов гемофильной группы

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ВЫДЕЛЕНИЮ И ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРОБОВ РОДА Haemophilus

Н.infiuenzae палочка инфлюенцы причина заболеваний человека: бронхиты, пневмонии, эндокардиты, менингиты, гнойные воспаления суставов, абсцессы, заболевания кожи и ногтей и др, т.е. является Н.infiuenzae палочке инфлюенцы.

Биологические особенности гемофилов.

1. Ввысокая требовательность к крови человека или животных для роста на искусственных питательных средах.

Кровь для гемофилов, как источник необходимых факторов роста X и У.

· Фактор крови Х-гемин, активизирует пероксидазы, чем стимулирует рост гемофильных бактерий.

· Фактор крови Y-никотин-амид-аденин-динуклеотид (NAD), содержится в эритроцитах, является составной частью витаминов группы В, принимает участие в окислительно-восстановительных процессах при росте клеток.

Фактор Y встре­чается во многих продуктах (дрожжи, картофель), синтезируется некоторыми микробами при их росте: сарцины, стафилококки, нейссерии, дифтерийная палочка и др. Рост гемофилов улучшается вблизи этиx колоний. Подобный феномен носит название сателлизма.

Для выделения микробов гемофильной группы при­меняют

Плотные среды:

· 5-10% КА, или

· агары с прогретой(шоколадный агар) либо

· кипяченой кроbью.

Жидкие сред:

· КБ,

· бульон Левинталя пли

· бульон с пептическим переваром (крови) Файлдса.

Культуральные свойства:

· Крупные, полупрозрачные, нежные, сочные ко­лони до d – 2мм на агаре с прогретой или кипяченой кровью (шоколадный) рост через 24 часа при 37.

· легко снимаются со среды.

Пышный рост на средах с прогретой кровью объясняется тем, что нагрева­ние крови способствует освобождению из эритроцитов факторов, легкому усвоению их бакте­риями, разрушению ингибиторов.

В мазках Н.infiuenzaeмелкие грамотрицательные палочки. При окраске мазка тушью по Гинсу обнаруживается хорошо выраженная капсула.

Посев материала для исследования и выделений чистой культуры.

Материал для бактериологической диагностики гемофилов: мокрота, отделяемое при бронхоско­пии, биопсия органов, кровь, ликвор, серозные жидкости.

Засевают бактериальной петлей d-0,2 мм на одну из плотных питательных сред с кровью.

Исходный посевной материал параллельно высевают и на прос­той питательный агар. Гемофильные микробы не растут на простых средах

Из подозрительных на плотных средах с кровью колоний делают мазки и окрашивают по Граму. Наличие в мазках мелких грамотрицательных палочек является первым этапом подтверждения выделения одного из видов гемофильных ми­кробов.

Подозрительные колонии отсевают в пробирки с шоколадным агаром для накопления биомассы. Одновременно производят посев на среды без крови.

Рост на шоколадном агаре и отсутствие роста на простых питательных средах

указывает, что выросшие культуры отнесятся к гемофилам.

Характеристика свойств микробов гемофильной группы

Следующий этап идентификации изучение биохимических особенностей. Для этого производят биохимические исследования на ферменты - каталазу, оксидазу, уреазу, β-галактозидазу.

Таким образом, H. Influenzae может быть определена по комплексу свойств:

· отсутствию роста на простых питательных средах,

· типичной морфологии клеток,

· отсутствию фермента оксидазы и β- галактозидазы,

· наличию фермента уреазы,

· специфическим реакциям с политиповой и монотиповой сыворотками Н. Influenzae.

Поиск по сайту: