|
|||||||
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция |
Методом микроскопии1 Подсчет общего числа лейкоцитов в периферической крови человека.
1.1 Собрать камеру Горяева. Для этого на камеру положить чистое покровное стекло и осторожно прижать его по краям. Показателем того, что камера собрана правильно, служит появление интерференционных колец по краям покровного стекла;
1.2 10 мкл цельной крови смешать с красителем С. И. Задорожного и И. М. Дозморова в соотношении 1:20. Поднести каплю исследуемой крови к боковой кромке покровного стекла и осторожно заполнить камеру;
1.3 Настроить микроскоп, подобрать освещение и увеличение (объектив×20), чтобы четко различать линии сетки камеры и клетки лейкоцитов. Подсчитать число лейкоцитов в 100 больших квадратах или 1600 малых квадратах камеры Горяева. При подсчете числа клеток следует придерживаться следующего правила. В общее число подсчитанных лейкоцитов включают все клетки, лежащие на верхней и левой сторонах квадратах камеры Горяева, но не учитывают клетки, расположенные на его нижней и правой сторонах.
1.4 Количество лейкоцитов в 1 мм3 (N) вычисляют по формуле:
где A – количество посчитанных клеток, 20 – разведение крови, 10 – глубина камеры, 400 – площадь малого квадрата, 1600 – число малых квадратов.
2. Определение жизнеспособности клеток.
- рабочий раствор 0,2 % раствор трипанового синего в изотоническом растворе Хенкса смешать в равных объемах с цельной кровью; - в камере Горяева осуществить подсчет 100 клеток, отмечая клетки с окрашенными ядрами (погибшие) и неокрашенными ядрами (живые); - рассчитать долю жизнеспособных клеток (N) по формуле:
3 Заполнить протокол по определению количества и жизнеспособности лейкоцитов периферической крови.
Определение CD 34+ ГСК и их Поиск по сайту: |
Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.004 сек.) |