|
|||||||
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция |
Реакция связывания комплемента, оценка иммунного статусаПрактические навыки, осваиваемые студентами на занятии: 1. Постановка и учет основного опыта реакции связывания комплемента (РСК).
Алгоритм постановки основного опыта реакции связывания комплемента
Реакция ставится в общем объеме 1,0 мл, каждый из ингредиентов добавляется в рабочей дозе, содержащейся в 0,2 мл. Берут шесть пробирок: в первую пробирку вносят исследуемую сыворотку (пациента), антиген и комплемент (опытная пробирка), во вторую – положительную сыворотку, антиген и комплемент (положительный контроль), в третью - отрицательную сыворотку, антиген и комплемент (отрицательный контроль), в четвертую - исследуемую сыворотку, комплемент и вместо антигена изотонический раствор натрия хлорида (контроль сыворотки), в пятую - антиген, комплемент и 0,85 % раствор натрия хлорида вместо сыворотки (контроль антигена), в шестую – только 0,6 мл 0,85 % раствор натрия хлорида (контроль гемсистемы).
Одновременно готовят гемолитическую систему, смешивая равные объемы гемолитическую сыворотку в тройном титре и 3 % взвесь эритроцитов барана. Пробирки ставят в термостат при температуре 37 0С на 1 ч. Затем во все пробирки добавляют по 0.4 мл гемолитической системы (индикаторная система). После тщательного смешивания ингредиентов пробирки вновь ставят в термостат при 37 °С на 1 ч. Результаты учитывают после извлечения из термостата и окончательно - после 15 - 18 ч нахождения реакции в холодильнике. При окончательном учете интенсивность реакции связывания комплемента учитывают по факту отсутствия реакции гемолиза, отмечает плюсами: "++++" - резко положительная реакция с полной задержкой гемолиза, жидкость в пробирке бесцветная, все эритроциты осели на дно; "+++", "++" - положительная реакция, отличается нарастанием окраски жидкости вследствие гемолиза уменьшения количества эритроцитов в осадке; "+" - слабо положительная реакция, жидкость интенсивно окрашена, на дне пробирки незначительное количество эритроцитов. Отрицательная реакция связывания комплемента обозначается знаком "–" при этом наблюдается полный гемолиз, жидкость в пробирке имеет интенсивно-розовую окраску («лаковая кровь»). Во всех контрольных пробирках, за исключением положительного контроля сыворотки и контроля гемсистемы при правильной постановке РСК должен наблюдаться гемолиз. В настоящее время РСК ставят не в пробирках, а в специальных планшетах, внося в лунки планшета те же самые компоненты реакции и в той же самой последовательности, но объем компонентов РСК, вносимых в каждую из лунок значительно меньше (как минимум в 10 раз). Занятие № 17 Поиск по сайту: |
Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.003 сек.) |