Культивирование и индикация вирусов

Культивирования:

Ø Лабораторное животные

Ø Куриный эмбрион (8-10 дней)

Ø Клеточные структуры ткани – монослой однородных клеток фиксированный к стеклу, который растет и размножается на специальной питательной среде (199). Они могут быть первичными – из нормальных клеток (культура Фб), она может дать только первичные регенерации в пробирке; перевиваемая - готовится как правило из опухолевой клетки (Hela), может пассироваться в течении долгих лет; Попупрививаемая – из норамльных клеток пассируется 10-15 раз.

Индикация:

На эмбрионе:

Ø По реакции гемагглютинации (ГМА), склеивание эритроцитов под влиянием вируса.

Ø Реакция имуноферментативная (ИФА)

Ø РИФ

На клеточной культуре:

Ø По цитопатическому действию (ЦПД), которое проявляется в гибели, деструкции или образованию синтиция.

Ø По выявлению специфических вирусных включений. Могут находится в цитоплазме, ядре (вирус бешенства).

Ø Реакции имунофлюоресценции (РИФ)

Ø Реакция гемабсорбции

Ø По изменению цвета индикатора питательной среды (199) – цветная проба.

Ø Метод электронной микроскопии

На животных:

Ø По клинической симптоматике

Ø По специфическим изменением клеток

Ø По включениям методом РИФ

Диагностика:

Вирусоскопия - обнаружение непосредственно в материале или найти его антигены, включения.

Ø Электронная микроскопия

Ø РИФ

Ø ИФА

Ø Цитоскопически

Вирусологический – включает культивирование вирусов, обнаружение вируса, идентификация вируса.

Ø Серологичекий – парные сыворотки больного для обнаружения специфических противовирусных антител.

Генетические - обнаружить в материале больного вирусные нуклеиновые кислоты.

Ø Метод гибридизации

Ø Метод полимеразной цепной реакцией ПЦР

тема: Физиология микроорганизмов.

Включает питание, дыхания, размножение бактерий.

Метаболизм.

Метаболизм микрообранизмов – совокупность всех биохимических процессов происходящих в клетке. Различают энергитичекий метаболизм 9катабализм) – реакции расщепления при которых выделяется энергия; конструктивный (анабализм) – процессы синтеза веществ из которых образуются основные структуры клетки, требует энергии. Оба типа метаболизма связаны между собой, происходят одновременно, деления на два типа условно. Для питания микроорганизмов требуется 4 главных элемента: углерод, кислород, водород, азот. Эти элементы являются основой органических веществ и составляют 95% клетки. Кроме этого требуются макроэлементы: сера, фосфор, калий,, магний, кальция и микроэлементы: натрий, железо, цинк, марганец, медь.

1. Аутотрофный (сомопитающийся)

А широко распростеронены для культивирования неорганические питательные среды. Для Г среды с легко усвояемыми белками.

Микроорганизмы неспособные синтезировать, конкретное в-во из органического соединения – ауксотрофы обитают в среде обитания конкретных факторов роста (аминокислоты, пуриновые основания, пиримидиновые основания, фосфолипиды, холестерин, витамины В, геммы) могут нуждаться в одном или нескольких факторов. Прототрофы могут сами синтезировать.

Транспорт питательных веществ в бактериальную клетку.

Поиск по сайту: