Рост на среде с крахмалом

Высев на агаризованную среду с крахмалом (в чашки Петри), содержащую (г/л): пептон – 10,0; КН₂Р0₄ – 5,0; растворимый крахмал – 2,0; агар – 15,0; рН 6,8 – 7,0, производят для определения образования микроорганизмами амилазы. Бактерии высевают петлей, проводя штрих по диаметру чашки или по центру сектора, на которые разделена чашка. Продолжительность культивирования бактерий 7 сут в термостате при температуре 30 °С. Гидролиз крахмала обнаруживают после обработки среды с выросшими бактериями раствором Люголя. Для этого на поверхность среды наливают от 3 до 5 мл раствора Люголя. Среда, содержащая крахмал, окрашивается в синий цвет, а зона гидролиза остается бесцветной или приобретает красно-бурую окраску, если крахмал гидролизовался до декстринов. Зону гидролиза крахмала измеряют от края штриха (колонии) до границы светлой зоны (мм). Чем больше диаметр светлой зоны, тем выше активность амилазы.

2.2.6 Определение чувствительности бактерий
к антибиотикам

Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам удобно определять с помощью готовых бумажных дисков, пропитанных определенными антибиотиками. Исследуемые микроорганизмы выращивают на соответствующей плотной питательной среде. Готовят в стерильной водопроводной воде густую суспензию изучаемого микроорганизма путем смыва клеток водой с поверхности твердой питательной среды. Работая около пламени горелки, вносят 1 мл полученной суспензии
в пробирку с 20 мл расплавленной и остуженной до температуры 50 ºСагаризованнойсреды, например, с мясопептонным агаром (МПА). Если микроорганизмы выращивали в жидкой питательной среде, то в агар вносят соответствующий объем культуры. Содержимое пробирки быстро и тщательно перемешивают и переливают в стерильную чашку Петри.

Когда среда застынет, на ее поверхность помещают бумаж-
ные диски на равном расстоянии друг от друга и на расстоянии 1,5…2,0 см от края чашки. Чашки Петри выдерживают 2 часа при комнатной температуре для лучшей диффузии антибиотиков в толщу агаризованной среды, а затем, не переворачивая, помещают в термостат на 24 ч при температуре 30 ºС. Через суткиотмечают образование зон подавления роста исследуемых микроорганизмов вокруг дисков. Если исследуемая бактерия чувствительна к определенным антибиотикам, то вокруг дисков обнаруживаются зоны отсутствия роста культуры. Диаметр зоны подавления роста измеряют миллиметровой линейкой и записывают результаты. Зона более 30 мм свидетельствует о высокой чувствительности микроорганизмов к антибиотику, а менее 12 мм – о слабой чувствительности.

Когда в распоряжении экспериментатора имеются растворы
антибиотических веществ или культуральные жидкости, содержащие антибиотик, используют метод с применением лунок в толще агара.
В этом случае в застывшей агаризованной среде, засеянной испытуемым микроорганизмом, стерильным пробочным сверлом (диаметр от 6 до 8 мм) делают лунки на расстоянии 1,5…2,0 см от края чашки.
В лунки вносят растворы антибиотиков или культуральную жидкость. Этот метод позволяет также выявить способность к образованию антибиотических веществ микроорганизмами, выращенными в жидкой среде.

Таблица 1 – Свойства идентифицируемой бактерии рода Propionibacterium

Вывод: В ходе данного исследования была проведена идентификация микроорганизмов рода Propionibacterium. Культура практически не чувствительна к антибиотикам, но обладает рядом других физико-биохимических свойств: присутствие казеина и амилазы, образование кислых продуктов метаболизма.

Поиск по сайту: