 |
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция
Ход работы
Определение чувствительности проводится на одной из следующих питательных сред:
1) среда на отваре Хоттингера с содержанием 120-140 мг% аммонийного азота, 1-2% агара и значением рН 7,2-7,4;
2) казеиново-дрожжевая среда с таким же содержанием аммонийного азота, агара и значением рН;
3) мясопептонная среда с таким же содержанием аммонийного азота, агара и значением рН.
Допускается добавление в среду 5% крови или сыворотки, что не оказывает отрицательного влияния на результаты анализа.
Для проведения анализа на чувствительность в стерильные чашки Петри разливают по 20 мл одной из вышеуказанных питательных сред. Перед исследованием чашки. Затем на поверхность агара засевают суспензию суточной агаровой культуры исследуемого микроорганизма в сахарном бульоне (1 млрд. микробных клеток на 1 мл по оптическому стандарту). Покачиванием чашки культуру равномерно распределяют по поверхности среды, а ее излишек отсасывают пастеровской пипеткой. На поверхность агара пинцетом накладывают диски с различными антибактериальными препаратами (до 5-6). Чашки выдерживают 30 мин при комнатной температуре (период преддиффузии препаратов в агар). Затем чашки помещают в термостат при 370 на 16-18 ч. Во избежание размывания зон задержки роста конденсационной водой чашки ставят вверх дном.
Диаметр зон задержки роста микроорганизмов измеряют вокруг дисков с антибиотиками, включая диаметр самого диска. Единичные колонии и рост микроорганизмов в виде тонкой пленки внутри зоны задержки роста не учитывают. Отсутствие зоны задержки роста указывает на то, что исследуемый штамм устойчив к данному препарату. Зоны диаметром до 10 мм указывают на малую чувствительность, диаметром более 10 мм - на высокую чувствительность микроорганизма.
В отчете диаметр зоны подавления роста не указывается, а отмечается, какой чувствительностью обладает исследуемая культура.
Материалы и оборудование
Стандартные диски из фильтровальной бумаги, пропитанные различными антибиотиками, стерильные чашки Петри, культуры исследуемых микроорганизмов, стерильные пипетки на 20 мл и пастеровские пипетки, пинцеты, линейки.
РАБОТА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ МИКРОБИОЦЕНОЗОВ ПОЧВЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЕЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
Цель - ознакомить с существующими методами исследования микробиоценозов почвы, применяемых при качественной и количественной характеристике антропогенных приемов воздействия на почву. В зависимости от стоящих перед исследователем задач следует применять разные методы исследований.
Поиск по сайту: