Ход работы. Из выкопанных монолитов почвы с растениями стерильным пинцетом и ножницами отбирают 1 г молодых корней (примерно одного диаметра) с приставшими к ним

Из выкопанных монолитов почвы с растениями стерильным пинцетом и ножницами отбирают 1 г молодых корней (примерно одного диаметра) с приставшими к ним частицами почвы. Одновременно берут навеску почвы для определения влажности. Корни помещают в колбу со 100 мл стерилизо­ванной водопроводной воды и взбалтывают в течение 2 мин. Стерильным крючком, приготовленным из обычной иглы, корни извлекают из колбы и переносят последовательно во вторую, третью, четвертую, пятую, шестую, седьмую колбы, также содержащие по 100 мл стерильной водопроводной воды. В каждой колбе корни отмывают по 2 мин. Желательно, чтобы в воду последней (седьмой) колбы перед стерилизацией было добавлено 3-5 г песка.

Для анализа качественного состава бактерий ризосферы и ризопланы из каждой колбы отдельной стерильной пипеткой берут по 0,05 мл отмывной воды, наносят на поверхность питательной пластины (МПА) и отдельным шпателем, держа полуоткрытую чашку почти вертикально около пламени го­релки, втирают досуха. Чашки помещают в термостат и выдерживают при температуре 28-30⁰. Спустя 3-5 сут можно проводить анализ.

В результате опыта было обнаружено, что по мере отмывания корней численность бактерий не убывает, а в ряде случаев даже увеличивается. При этом в чашках с посевом из первых отмываний много крупных колоний спорообразующих бактерий. По мере отмывания количество колоний бациллярных форм уменьшается, а число мелкоточечных колоний бактерий рода Psеudоmоnаs, не образующих спор, и колоний бактерий рода Mycobacterium возрастает. Колонии бактерий рода Рsеudоmоnаs обычно прозрачные, колонии микобактерий окрашены в желтый или оранжевый цвет.

Материалы и оборудование

Для постановки опыта: монолит с растениями или вегетационный сосуд с растениями, пинцеты, ножницы, часовые стекла, 6 колб емкостью 250 мл, содержащих по 100 мл стерильной водопроводной воды (одна из них с добавлением песка 3-5 г), крючки из проволоки, стерильные градуированные и моровские пипетки на 1 мл, стерильные шпатели, стерильные чашки Петри, МПА в пробирках, водяная баня, треножник.

Для результатов опыта: микроскопы и все необходимое для приготовления препаратов и микроскопирования.

РАБОТА 5. ИССЛЕДОВАНИЕ СВОБОДНОЖИВУЩИХ И СИМБИОТИЧЕСКИХ АЗОТФИКСИРУЮЩИХ БАКТЕРИЙ

Цель работы - ознакомиться с методами выделения чистых культур азотобактера, клостридиума и клубеньковых бактерий, со способом определения азотфиксирующей активности (эффективности) клубеньковых бактерий.

Поиск по сайту: