Реакции торможения гемагглютинации (РТГА) для определения типа вируса гриппа

Для ретроспективных серо-эпидемиологических исследований сывороток крови людей с целью определения подъема уровня специфических антител к вирусу гриппа определенных серотипов чаще всего используют реакцию торможения гемагглютинации (РТГА). Это простой и надежный метод, который не требует инфекционного вируса и поэтому его можно проводить в лабораторных помещениях второго класса биобезопасности.

В двух референс сыворотках к Н5 гемагглютинину вируса гриппа и в антисыворотках хорьков к аборигенным штаммам вируса гриппа птиц определяли уровень антител к Н5 референс антигену и штаммам вируса гриппа A/Common gull/Chany/2006 (H5N1), A/duck/Tuva/01/06 (H5N1) и A/Anas platyrhynchos/Chany Lake/9/03 (H5N3) с помощью реакции торможения гемагглютинации. Были использованы эритроциты лошади, макаки-резус, барана, морской свинки, гуся и петуха.

Реакция кольцепреципитации На слой антисыворотки наслаивают жидкость, содержащую растворимый Аг, и через несколько секунд наблюдают образование кольца преципитата (рис. 10-16, А). Широкое распространение получила реакция термопреципитации Асколи на Аг возбудителя сибирской язвы, использующая Аг, экстрагированные кипячением из различного сельскохозяйственного сырья.

Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), те происходит связывание комплемента комплексом антиген - антитело. Если же комплекс антиген - антитело не образуется, то комплемент остается свободным. PCK проводят в две фазы 1-я фаза - инкубация смеси, содержащей антиген + антитело + комплемент, 2-я фаза (индикаторная) - выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген - антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет (реакция положительная). Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит - антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная).

Схема РСК с сывороткой больного
Схема РСК с сывороткой здорового

Критерии оценки постановки реакции определения токсигенности дифтерийных бактерий.

Поиск по сайту: