АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция

Практическое задание. Фосфатазы - ферменты, катализирующие гидролиз фосфорных эфиров

Читайте также:
  1. Window(x1, y1, x2, y2); Задание окна на экране.
  2. Б) Задание на проверку и коррекцию исходного уровня.
  3. В основной части решается практическое задание.
  4. Вопрос: Теоретические границы переходных типов мировоззрения, их практическое воплощение в Эллинистический период и эпоху Возрождения.
  5. Второй блок. Количество баллов за задание – 3.
  6. Глава 1. Первое практическое занятие по методу ПМТ
  7. Домашнее задание
  8. Домашнее задание
  9. Домашнее задание
  10. Домашнее задание
  11. Домашнее задание
  12. Домашнее задание

Фосфатазы - ферменты, катализирующие гидролиз фосфорных эфиров. В частности, их субстратом является пара -нитрофенилфосфат (пНФФ):

Образующийся в результате реакции паранитрофенол в щелочной среде имеет желтую окраску. По интенсивности окраски раствора определяют количество образовавшегося продукта реакции. Используя эти данные, рассчитывают скорость ферментативной реакции.

 

a) Используя табличные данные, постройте график зависимости скорости ферментативной реакции, катализируемой фосфатазой, от концентрации субстрата.

 

Концентрация субстрата, ммоль/дм3 Скорость реакции, ммоль/(дм3*мин)                                    
0,5                                    
1,0                                    
2,0                                    
3,0                                    
4,0                                    
5,0                                    

 

 

Определите КМ и Vmax.

 

 

б) На основании данных о скорости ферментативной реакции при различных значениях рН, представленных в таблице, постройте график зависимости скорости ферментативной реакции от рН.

 

рН Скорость реакции, ммоль/(дм3*мин)                                    
4,1                                    
4,5                                    
5,0                                    
5,5                                    
6,0                                    
6,5                                    
7,0                                    
7,5                                    
8,0                                    

 

Определите рН-оптимум фосфатазы.

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

в) Постройте график зависимости скорости ферментативной реакции от температуры. Данные о скорости ферментативной реакции при различных значениях температуры представлены в таблице.

Температура, оС Скорость реакции, ммоль/(дм3*мин)
   
   
   
   
   
  7,0
  2,6
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 
                                 

 

Определите температурный оптимум фосфатазы.

____________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

 

г) Конкурентным ингибитором фосфатаз является фосфат. Постройте графики зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в отсутствие и в присутствии фосфата. Данные представлены в таблице.

 

Концентрация субстрата, ммоль/дм3 Скорость реакции в отсутствие ингибитора, ммоль/(дм3*мин) Скорость реакции в присутствии ингибитора, ммоль/(дм3*мин)
0,5    
1,0   7,5
2,0    
3,0   17,5
4,0    
5,0    

 

                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   

 

Определите КМ и Vmax ферментативной реакции в присутствии и в отсутствие конкурентного ингибитора. Сделайте вывод, каким образом фосфат влияет на эти показатели.

 

д) Фторид является неконкурентным ингибитором фосфатаз. Постройте графики зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата в отсутствие и в присутствии фторида. Данные представлены в таблице.

 

Концентрация субстрата ммоль/дм3 Скорость реакции в отсутствие ингибитора, ммоль/(дм3*мин) Скорость реакции в присутствии ингибитора, ммоль/(дм3*мин)
0,5    
1,0    
2,0    
3,0    
4,0    
5,0    
6,0 -  
8,0 -  

 

 

                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   
                                                                   

 

Определите КМ и Vmax ферментативной реакции в присутствии и в отсутствие конкурентного ингибитора. Сделайте вывод, каким образом фторид влияет на эти показатели.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 |

Поиск по сайту:

Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.008 сек.)