АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция

Опыт 1. Определение активности амилазы (диастазы) мочи по Вольгемуту

Читайте также:
  1. Access. Базы данных. Определение ключей и составление запросов.
  2. I. Определение
  3. I. Определение
  4. I. Определение основной и дополнительной зарплаты работников ведется с учетом рабочих, предусмотренных технологической картой.
  5. I. Определение проблемы и целей исследования
  6. I. Определение ранга матрицы
  7. I. Составление дифференциальных уравнений и определение передаточных функций
  8. III . Коэффициент деловой активности.
  9. III. Определение оптимального уровня денежных средств.
  10. Автоматическое порождение письменного текста: определение, этапы, общая структура системы порождения
  11. Аксиомы науки о безопасности жизнедеятельности. Определение и сущность.
  12. Анализ функциональной связи между затратами, объемом продаж и прибылью. Определение безубыточного объема продаж и зоны безопасности предприятия

 

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

3. Водяная баня.

Реактивы. 1. 0,85%-ный раствор хлорида натрия.

2. Моча.

3. Крахмал, 0,1%-ный раствор.

4. Реактив Люголя.

 

Принцип метода: Определение активности амилазы в биологических жидкостях (моча, сыворотка крови, слюна) основано на нахождении наименьшего количества фермента, необходимого для полного расщепления добавленного крахмала в стандартных условиях.

 

Амилазная активность мочи выражается количеством миллилитров 0,1% раствора крахмала, которое расщепляется ферментом, содержащимся в 1 мл неразведенной мочи, при температуре 450С за 15 минут.

 

В норме моча человека содержит мало амилазы, происходящей из поджелудочной железы. Активность амилазы (диастазы) мочи обозначается А450 (или d450). В норме активность амилазы мочи равна 16-64 ед.

 

Определение активности амилазы в моче и сыворотке крови широко используется в клинической практике с целью диагностики заболеваний поджелудочной железы. При острых панкреатитах амилазная активность мочи и сыворотки крови увеличивается в десятки раз, особенно в первые сутки заболевания, а затем постепенно возвращается к норме. При почечной недостаточности амилаза в моче отсутствует.

 

1. Пронумеруйте 10 пробирок. В каждую налейте по 1 мл 0,85% раствора хлорида натрия.

2. В первую пробирку налейте 1 мл исследуемой мочи, перемешайте, 3 раза втяните смесь в пипетку и выпустите ее в пробирку.

3. 1 мл раствора перенесите во вторую пробирку, перемешайте, 3 раза втяните смесь в пипетку и выпустите ее в пробирку.

4. 1 мл раствора перенесите в третью пробирку и т.д.

5. Из последней пробирки 1 мл смеси вылейте.

6. Во все пробирки добавьте по 1 мл 0,85% раствора хлорида натрия.

7. Начиная с десятой пробирки, добавьте во все пробирки по 2 мл 0,1%-ного раствора крахмала, перемешивая при этом содержимое всех пробирок.

8. Все 10 пробирок одновременно поставьте на 15 минут в водяную баню (450С, не допускать превышения температуры!).

9. Через 15 минут охладите пробирки под краном и в каждую добавьте по 2 капли реактива Люголя (раствора йода).

10. Результаты эксперимента занесите в таблицу:

 

 

Номер пробирки Степень разведения мочи Окраска содержимого пробирки после добавления реактива Люголя
  1:2  
  1:4  
  1:8  
  1:16  
  1:32  
  1:64  
  1:128  
  1:256  
  1:512  
  1:1024  

 

11. Для подсчета активности амилазы мочи учитывают ту пробирку, в которой уже нет синего оттенка (т.е. пробирка с желтой окраской).

Расчёт: Предположим, что полное расщепление крахмала произошло в первых четырёх пробирках. В четвёртой пробирке разведение мочи 1:16. Следовательно: 1/16 мл мочи расщепила 2 мл 0,1% раствора крахмала, 1 мл неразведенной мочи расщепит Х мл 0,1% раствора крахмала.

Следовательно, активность амилазы (диастазы) мочи равна 32 ед.

 


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 |

Поиск по сайту:

Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.003 сек.)