Опыт 4. Определение изоэлектрической точки белка (демонстрационный)

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

3. Стеклянная палочка.

Реактивы. 1. Дигидрофосфат калия, 0,2 М раствор.

2. Лимонная кислота, 0,1 М раствор.

3. Желатин, порошок.

1. Возьмите 7 пробирок одинакового диаметра.

2. Насыпьте в каждую пробирку меркой по 1 см измельченного в порошок желатина.

3. Прилейте в каждую пробирку по 10 мл буферного раствора с определенной величиной рН (см. таблицу).

Через 15-20 мин измерьте высоту каждого столбика набухшего желатина. Постройте график зависимости степени набухания от величины рН и определите изоэлектрическую точку желатина (рI). Аргументируйте ответ.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Занятие № 3. «Физико-химические свойства углеводов»

Цель занятия: изучить качественные реакции углеводов, лежащих в основе их количественного определения в биологическом материале.

ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:

1. Биологические функции углеводов.

2. Классификация углеводов.

3. Строение углеводов.

4. Физико-химические свойства углеводов.

5. Строение и свойства гетерополисахаридов. Биологическая роль данных соединений.

Дата выполнения______ Балл _____Подпись преподавателя ____________

Экспериментальная работа.

Опыт 1. Качественная реакция Молиша на пентозную группировку.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Глюкоза, 1%-ный раствор.

2. Сахароза, 1%-ный раствор.

3. Крахмал, 1%-ный раствор.

4. a-нафтола, 0,1%-ный раствор.

5. Серная кислота, концентрированная.

6. Яичный белок, 10%-ный раствор.

7. Уксусная кислота, концентрированная.

1. В пробирку добавьте 0,5 мл 1%-ного раствора углевода (глюкозы или сахарозы).

2. Добавьте 2 капли свежеприготовленного 0,1%-ного спиртового раствора a-нафтола (или 1%-ного спиртового раствора тимола). Смесь слегка мутнеет из-за выпадения a-нафтола в осадок.

3. Осторожно из пипетки по стенке пробирки прилейте 1 мл концентрированной серной кислоты так, чтобы она опустилась на дно, не смешавшись с водным слоем. При наличии в исследуемой пробе углеводов на границе слоев появляется красно-фиолетовое кольцо.

4. Повторите пункт 1-3 с 0,5 мл раствора яичного белка.

5. Повторите пункт 1-3 с муцином слюны. Для получения последнего соберите в пробирку приблизительно 2 мл слюны и по каплям (4-5 капель) прилейте концентрированную уксусную кислоту. После осторожного отделения жидкости на дне пробирки остается сгусток муцина.

Объясните результаты опыта.

Поиск по сайту: