Предельно допустимые минимальные концентрации микро- и ультрамикроэлементов

Существование величин ПДК_мин прямо следует из теоретического рассмотрения проблемы определения питательной ценности косметических композиций (см. гл.5). Приведенная на рис.5.1. начальная часть графика (восходящая ветвь) ограничивается величиной концентрации, обозначенной как C_i^доп.. Фактически эта величина соответствует минимальной предельно допустимой величине - ПДКⁱ_мин.. Действительно, уменьшение концентрации любого питательного ингредиента ниже этой величины приводит к снижению ростовых характеристик клеточной системы.

При оценке величин C_i^опт мы воспользовались данными по составам многочисленных биотехнологических питательных сред, полагая, что содержание их ингредиентов в определенной степени минимизировано, то есть C_i^опт ПДКⁱ_мин.. Однако имеется и экспериментальное доказательство существования начального участка кривой, представленной на рис. 5.1.

В свое время, при решении проблемы освобождения сыворотки животных от гамма-глобулиновой фракции с помощью обработки полиэтиленгликолем, обнаружилось существенное снижение ростовых характеристик клеток, помещаемых в питательные среды, приготовленные с добавлением обработанной сыворотки. Учитывая склонность белков к сорбированию разнообразных низкомолекулярных веществ, предположили, что при обработке сыворотки полиэтиленгликолем, ведущей к осаждению высокомолекулярных белков, в ее составе происходит снижение содержания низкомолекулярных веществ, в частности, микроэлементов - железа, меди и цинка. Эти элементы являются жизненно необходимыми, принимающими участие в работе многих ферментативных клеточных систем.

В табл. 7.10 приведено содержание железа, меди и цинка в сыворотках крови крупного рогатого скота (КРС) до и после обработки полиэтиленгликолем (КРС-ПЭГ), а также в наиболее полноценной сыворотке крови плодов коровы (FBS). Как видно из таблицы, обработка полиэтиленгликолем сыворотки КРС приводит к снижению содержания в ней микроэлементов с одновременным уменьшением ростовой активности клеток.

Наибольшее предпочтение при культивировании клеток отдаётся сыворотке крови плодов коровы (FBS), обеспечивающей хороший рост и высокий уровень вируспродукции из-за низкого содержания в ней гамма-глобулинов. Однако стоимость сыворотки FBS и ограниченность источников её получения стимулировали поиск замены этой составляющей питательных сред. Собственно говоря, обработка полиэтиленгликолем более дешёвой и доступной сыворотки КРС позволяла осадить гамма-глобулиновую фракцию, приблизив её по этому параметру к сыворотке FBS. Оказалось, что ростовые характеристики клеточной системы в средах с добавлением КРС-ПЭГ значительно уменьшались по сравнению с добавлением исходной сыворотки КРС (см. табл.7.11).

Таблица 7.10 Содержание железа, цинка и меди в образцах сыворотки крови животных

^*)Приведены доверительные интервалы изменений значений с уровнем вероятности 95%. В скобках указано количество исследованных образцов. Здесь и далее приводятся экспериментальные данные, полученные Трошковой Г.П. и Мартынец Л.Д.

Таблица 7.11 Ростстимулирующие активности сывороток по отношению к клеткам ВНК-21^**)

^**)Обозначения КРС-ПЭГ и КРС-ПЭГ (железо, цинк) относятся к сыворотке крови КРС, обработанной полиэтиленгликолем, и к этой же сыворотке с добавлением солей железа и цинка. Контролем в этих экспериментах служила сыворотка крови КРС с высокими ростовыми характеристиками.

^***) Индексы пролиферации определялись как отношение числа клеток на третий день культивирования к числу первоначально посеянных клеток. Посадочная концентрация составляла 1·10-5 кл/мл. Эксперименты проводились с добавлением 10% сыворотки к питательной среде ПС-4 (опыт 1) и ПС-1 (опыт 2), производства НПО "Вектор".

Аналогичные результаты были получены при культивировании клеток непарного шелкопряда SCLD-135 в среде Грейса с добавлением 10% сыворотки КРС, обработанной полиэтиленгликолем (см. табл.7.12)

Однако, если в случае с клетками ВНК-21 (табл.7.11) и в случае с клетками SCLD-135 (табл.7.12) в сыворотку, обработанную полиэтиленгликолем, добавить недостающее количество микроэлементов (см. табл.7.10), ростовая активность клеток заметно повышается. Этот факт свидетельствует о наличии определённого минимального уровня содержания микроэлементов - предельно допустимой минимальной концентрации (ПДК^МЭ_мин).

Таблица 7.12 Ростстимулирующие активности сывороток по отношению к клеткам SCLD-135

Со всей определённостью можно полагать, что наличие величин ПДКⁱ_минхарактерно для любых ингредиентов питательных сред, и, соответственно, представления об этих величинах можно распространять на питательные косметические композиции.

Поиск по сайту: