Работа № 4 «Влияние высокой температуры на активность фермента»

1. Налить 10 мл 3% H₂O₂ в цилиндр объемом 100 мл и добавить 50 мл дистиллированной воды.

2. Вылить получившийся раствор в колбу Эрленмейера, положить в нее брусок для магнитной мешалки, поставить колбу на магнитную мешалку, зафиксировать горловину зажимом (рис.).

3. Добавить 1 мл «печеночного сока», предварительно прогретого на водяной бане и немедленно закрыть колбу пробкой (смазанной глицерином).

4. Немедленно начать измерения (время работы 60 сек).

5. Включить магнитную мешалку.

6. Зарисовать в тетрадь полученный график.

Наблюдения и результаты:

Выделение O₂ не наблюдается. Кривая давления не возрастает, что говорит о потере ферментативной активности при нагревании вследствие денатурации.

Работа № 5 «Влияние низкой температуры на активность фермента»:

1. Налить 10 мл 3% H₂O₂ в цилиндр объемом 100 мл и добавить 50 мл дистиллированной воды.

2. Вылить получившийся раствор в колбу Эрленмейера, положить в нее брусок для магнитной мешалки, поставить колбу на магнитную мешалку, зафиксировать горловину зажимом (рис.).

3. Добавить 1 мл охлажденного «печеночного сока» и немедленно закрыть колбу пробкой (смазанной глицерином).

4. Немедленно начать измерения (время работы 120 сек).

5. Включить магнитную мешалку.

6. Зарисовать в тетрадь полученный график.

Наблюдения и результаты:

В колбе наблюдается отчетливое выделение O₂. Кривая давления резко возрастает, но затем вертикально падает из-за того, что резиновую пробку выбило давлением. Резкое охлаждение, в отличие от нагревания, дезактивирует каталазу лишь временно. При нагревании раствора до 37^о активность фермента возрастает.

Клинико – диагностическое значение:

1. Каталаза является ферментом, простетическая группа которого идентична гему. В крови каталаза содержится почти исключительно в строме эритроцитов.

1) Активность фермента крови выражают каталазным числом (количество мг Н₂О_2, которое разлагается 1 мкл исследуемой крови). В норме каталазное число составляет 10 – 15 единиц. Определение активности каталазы имеет значение для диагностики рака, анемии, туберкулеза. При этих заболеваниях активность фермента снижается.

2) 3% раствор Н₂О₂ применяют в качестве дезинфицирующего и дезодорирующего средства для промываний и полосканий при воспалительных заболеваний слизистых оболочек (стоматиты, ангина), обработки ран и т.п.

2. Термолабильность ферментов учитывается в практической медицине в следующих случаях:

1) для рационализации терапевтических приемов при развитии воспалительного процесса, сопровождающегося изменением терморегуляции (повышение температуры тела при лихорадочных состояниях);

2) снижение интенсивности метаболических процессов путем гипотермии при выполнении тяжелых хирургических манипуляций с целью уменьшения осложнений (кардиохирургия).

3) Снижение активности ферментов при охлаждении позволяет сохранять жизнеспособность клеток, тканей, органов (кровь, почки и др.) для трансплантации (метод низкотемпературной консервации

3. Ферменты обычно наиболее активны в пределах узкой зоны рН. рН крови человека колеблется в пределах от 7,37 до 7,43; изменение этих значений всегда критично для витальных функций организма. Сдвиг рН в кислую сторону называется АЦИДОЗ, в щелочную – АЛКАЛОЗ. Развитие этих состояния требует немедленного оказания медицинской помощи.

ВОПРОСЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ПО ТЕМЕ:

1. На чем основана низкотемпературная консервация органов и тканей, используемых в дальнейшем для трансплантации?

2. С чем связаны изменения характера метаболизма при ацидозе и алкалозе?

Список рекомендуемой литературы:

1. Березов Т.Т. Биологическая химия/Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин. – Изд.3-е. – М.: Медицина, 1998 – 704 с.

2. Биологическая химия: Учебник/Е.С, Северин, Т.Л. Алейникова и др.- М.: ООО

«Медицинское информационное агентство», 2008. - 368 с.

3. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. - М.: «ГЭОТАР-МЕД», 2003 – 784 с.

4. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина, А.Я. Николаева, 3 изд. - М.: «ГЭОТАР», 2005 – 441 с.

5. Биохимия с упражнениями и задачами: Учебник/Под ред. Е.С.Северина.- М.: «ГЭОТАР», 2008 – 384 с.

6. Методическое пособие для самостоятельной работы студентов по биологической химии

(в 2 частях). Часть I /Артюкова О.А., Хасина М.А. - Владивосток: Медицина ДВ, 2010. - 96 с.

7. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.:«Медицинское информационное агентство». – 2004. -566 с.

8. Хасина М.А. Словарь-справочник по клинической биохимии – Владивосток: «Медицина ДВ», 2008.

9. Щербак И.Г. Биологическая химия: Учебник. – СПб.: «Издательство СПбГМУ», 2005. – 480 с.

10. Лекции по дисциплине

Оснащение практического занятия:

1. Компьютерная приставка «Cobra-5»

2. Химическая посуда, реактивы

Практическое занятие № 5

Тема: «Строение и функции витаминов» ( лабораторно-практическое занятие)

Мотивация: знания химической структуры и функций витаминов необходимо для понимания их участия в метаболических процессах и для понимания механизмов нарушения обмена веществ при их недостатке.

Цель обучения, воспитания и развития: закрепить знания о строении и биологической роли витаминов как компонентов коферментов

Задачи, обучения, воспитания и развития: студент должен

1. Уметь писать формулы: коферментов НАД, ФМН,ПФ, витаминов В₂, В₆, РР, С.

2. Знать пределы физиологических колебаний биохимических показа­телей:суточную потребность человека в витаминах группы В, С; уровень экскреции витамина С

3. Знать и уметь объяснять значения терминов: гипервитаминоз, гиповитаминоз, авитаминоз, провитамины, антивитамины

Этапы проведения занятия:

1. Вводная часть
2. Основная часть занятия: лабораторная работа
3. Заключительная часть занятия

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ:

1. Витамины как незаменимые пищевые факторы. История развития витаминологии.

2. Классификация витаминов по химическому строению и свойствам..

3. Провитамины. Механизмы образования активных форм витаминов в организме.

4. Гипо- и авитаминозы. Экзо- и эндогенные причины нарушения баланса витаминов в организме, последствия, распространенность и подходы к профилактике гиповитаминозов. Антивитамины.

5. Гипервитаминозы. Причины и следствия передозировки витаминов А и Д.

6. Коферментные функции витаминов. Характеристика и биохимические функции витаминов В₁, В₂, РР, В₆, В₉, В₁₂, пантотеновой кислоты, С.

7. Жирорастворимые витамины (А, Д, Е, К). Характеристика и биохимические функции

8. Витамины в профилактике и лечении заболеваний. Витаминзависимые и витаминрезистентные состояния.

Ориентировочная основа деятельности студентов (ООД) для проведения лабораторной работы:

Поиск по сайту: