Клеткалар саны

2 сурет

Клеткалардың суспензиялы культуралардың өсуі бір немесе бірнеше келесі параметрлермен бағалануы мүмкін:

1) Клеткалар саны.

2) Тұндырылған клеткалар саны:

3) Ылғал және құрғақ масса.

4) Клекалардың өміршендігі.

Клеткалар саны

Суспензия өсуінің көрсеткіші тығыздықтың, яғни мл-гі клеткалар санының өзгеруі болып табылады. Суспензия тығыздығы 10 мин. уақыт бойы 60^оС температура кезінде 10-20% хром қышқыл ерітіндіде мацерациядан кейін гемоцитрометрде (Фукс-Розенталь камерасы) клеткаларды санау жолымен анықтайды. Санау келесі формула бойынша жүреді:

Х═ М* 1000

3,2

Х- мл-де клеткалар саны, М-камерада клеткалар саны 5 рет қайталағандағы орташа мәні.

Тұндырылған клеткалар көлемі (ТКК)

Суспензиялы культураны белгілі бір көлемін пластмассалы немесе шыны центрфужды 15 мл. көлемімен пробиркаға ауыстырады. 200g кезінде 5 мин бойы центрифугирлейді. ТКК- бұл суспензия көлемін құрайтын тұнба өлшемі; әдетте процентпен белгіленеді.

Ылғал және құрғақ масса

Әлсіз вакуумда Бюхнер воронкасына салынған, №1 Ватман фирмасының фильтрленген қағаз арқылы немесе алдын ала ылғалдандырылған және өлшенген нейлон арқылы клеткалар суспензиясын сүзеді. Клеткаларды дистильденген суда шаяды, вакуум астында суды тартып алады да, клеткаларды фильтрмен бірге қайта өлшейді. Құрғақ массаны анықтау үшін алдын ала құрғақ фильтрлерді өлшейді, сосын клеткаларды фильтрмен бірге 60^оС термостатта массасы тұрақты болғанға дейін құрғатады.

Клеткалардың өміршеңдігі

Клеткалар өміршеңдігін тірі интактты клеткалардан тұратын (Мыс, эванс көгі, метиленді синь, көлемнің 0,025% массамен) өмірлік бояумен бағалауға болады. Шыны таяқшасына суспензия тамшысын және жанына бояу тамшысын тамызамыз. Шыны таяқшамен араластыру қажет. 1000-нан кем емес өсірілген бірліктердің суммасында микроскоп астында санаймыз. Тірі клеткалардың пайызын санау керек.

Поиск по сайту: