 |
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция
Оценка ЭСМИ
Достоинства метода:
· относительно высокая чувствительность;
· высокая специфичность;
· ранний метод исследования.
Недостатки метода:
· длительность;
· не всегда доступен;
· опасность инфицирования;
· дорогостоящий.
Таблица 17
Схема экспериментального метода исследования
| Цели | 1. Выделение и идентификация чистой культуры микроорганизмов. | |||
| 2. Определение вирулентности и патогенности микроорганизмов. | ||||
| 3. Индикация и идентификация экзотоксинов. | ||||
| 4. Изучение патогенеза инфекционных болезней при воспроизведении экспериментальных инфекций. | ||||
| 5. Производство биологических препаратов. | ||||
| 6. Проверка безвредности и эффективности лечебных препаратов. | ||||
| 7. Лабораторные животные - доноры крови для приготовления кровяных питательных сред. | ||||
| Этапы | 1 - взятие и обработка материала | |||
| 2 – выбор и заражение лабораторного животного | ü здоровое и чувствительное ü мыши, крысы, кролики, бараны, лошади ü беспородные и линейные ü гнотобионты и гнотофоры | |||
| методы заражения: ü накожный ü внутрикожный ü подкожный ü внутримышечный ü внутривенный ü пероральный ü интраназальный ü внутриполостной ü внутриорганный | ||||
| прижизненно | ü наблюдение ü взятие материала для БЛМИ и СЛМИ ü постановка кожно-аллергических проб | |||
| гибель (умерщвление) животного, вскрытие | ü патологоанатомическая картина ü патоморфологическая картина ü препараты-отпечатки ü взятие материала для БЛМИ и СЛМИ | |||
| 4 – идентификация и заключение | ||||
| Оценка | достоинства | ü относительно высокая чувствительность ü высокая специфичность ü ранний метод исследования | ||
| недостатки | ü длительность ü не всегда доступен ü опасность инфицирования ü дорогостоящий | |||
ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ
СЕРОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ
Серологический (от лат. serum - сыворотка, logos – учение) метод исследования (СЛМИ) – метод, в основе которого лежит реакция специфического взаимодействия антигенов (Аг) и антител (Ат).
Используя этот метод, можно определить неизвестное Ат при взаимодействии с известным Аг, и наоборот.
Основные понятия.
Диагностическая сыворотка (известное Ат) – иммунная сыворотка, содержащая Ат известной специфичности в известном титре. Диагностические сыворотки получают путём иммунизации животных соответствующим Аг. В последнее время в этом качестве всё чаще используют моноклональные Ат.
Диагностикум (известный Аг) - взвесь в физрастворе известных микроорганизмов или извлечённых из них Аг. В качестве неспецифического диагностикума могут быть использованы перекрёстно реагирующие Аг.
Титр сыворотки – максимальное разведение сыворотки (или минимальное её количество), в котором обнаруживаются Ат.
Диагностический титр – разведение сыворотки, в котором реакция положительна только у больных и отрицательна у здоровых. Для одной инфекции диагностический титр каждой серологической реакции свой.
Парные сыворотки – сыворотки одного обследуемого, взятые с определённым интервалом для изучения динамики титра Ат. Первую сыворотку берут в начале заболевания, в острую стадию, вторую – при острых инфекциях – через 7–14 дней, при хронических инфекциях – через месяц.
Серонегативный период – стадия заболевания, в которой специфические Ат ещё не обнаруживаются, несмотря на наличие возбудителя («серологическое окно»).
Серопозитивный период – стадия заболевания, в которой специфические Ат обнаруживаются.
Сероконверсия – переход серонегативности в серопозитивность.
Задачи СЛМИ:
1) серодиагностика инфекционных заболеваний, основанная на обнаружении в сыворотке Ат; диагностическое значение имеют:
а) обнаружение Ат в диагностическом титре;
б) оценка динамики титра Ат. При установлении свежего случая заболевания диагностическое значение имеет 4-кратное нарастание титра Ат в парных сыворотках. Однако при наличии дополнительных клинических и эпидемиологических данных для установления диагноза достаточно 2-кратного нарастания титра Ат.
в) определение классоспецифичности антител чётко характеризует этапы инфекционного процесса, а также может служить косвенным прогностическим критерием. Так, выявление специфических IgM свидетельствует о свежем случае заболевания (инфекционная реакция). Выявление специфических IgG – анамнестическая реакция: постинфекционная (титр антител выше) или поствакцинальная (титр антител ниже).
2) серодиагностика аутоиммунных заболеваний и аллергических реакции немедленного типа, основанная на обнаружении в сыворотке Ат;
3) серодиагностика заболеваний, основанная на обнаружении Аг в биологических жидкостях или тканях:
а) экспресс-диагностика инфекционных заболеваний при обнаружении Аг микроорганизмов (например, диагностика хламидиозов, микоплазмозов, уреаплазмозов методом РИФ).
Количественное определение Аг микроорганизмов в динамике инфекционного процесса служит критерием эффективности проводимой антимикробной терапии.
б) диагностика опухолей при обнаружении в сыворотке опухолеассоциированных Аг (например, ПСА (простатспецифического Аг) при раке простаты).
4) определение активности гуморального поствакцинального индивидуального или коллективного иммунитета;
5) определение титров диагностических, лечебных и профилактических сывороток;
6) определение групп крови, подбор доноров при пересадке органов, определение гормонов (щитовидной железы, половых);
7) определение фальсификации пищевых продуктов, судмедэкспертиза на основании определения видовой принадлежности антигенов.
Материал для серологического исследования:
1) сыворотки, полученные из венозной крови, взятой в утреннее время, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 12 часов). За сутки до взятия крови необходимо исключить жирную пищу и прием алкоголя, за 1 час – курение. Необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки;
2) чистые культуры микроорганизмов, выделенные от больных или из объектов внешней среды;
3) патологический материал от больных (например, соскобы эпителия, пунктаты, биоптаты, секционный материал) для экспресс-обнаружения Аг микроорганизмов.
Поиск по сайту: