Биологический (экспериментальный) метод исследования: определение, цели, этапы, оценка

Биологический метод исследования - совокупность способов искусственного воспроизведения клинической картины инфекционных болезней или их синдромов на лабораторных животных. Этот метод преследует также ряд других целей:

1. Диагностика инфекционных болезней.

2. Выделение и идентификация чистой культуры.

3. Определение вирулентности.

4. Выделение и идентификация экзотоксинов.

5. Культивирование вирусов.

6. Получение иммунопрепаратов.

7. Проверка безвредности и эффективности лечебных препаратов (в т.ч. химиопрепаратов, иммунопрепаратов).

8. Лабораторные животные служат донорами крови для приготовления кровяных питательных сред и проведения исследований, связанных с использованием крови и её ингредиентов.

9. Изучение патогенеза заболевания.

Этапы метода:

1. Забор материала.

2. Обработка материала. Материал для исследования забирается в асептических условиях, в стерильную посуду, гомогенизируется и используется для заражения возможно быстрее.

3. Выбор лабораторного животного, исходя из его чувствительности к предполагаемому возбудителю, его стандартизация и маркировка.

Нелинейные животные. Одни виды постоянно разводят в лабораториях, питомниках и предприятиях по производству биопрепаратов, это так называемые лабораторные животные: белые мыши, белые крысы, морские свинки, кролики, хомяки, кошки, собаки, обезьяны, бараны, лошади.

Линейные животные. Методом тесного инбридинга (внутриродственного скрещивания) удалось вывести более 200 линий мышей, свыше 20 линий крыс, 7 линий морских свинок, несколько линий кроликов. Среди диких животных чистых линий не существует. Линейные лабораторные животные очень чувствительны к неблагоприятным факторам окружающей среды, поэтому условия содержания их должны быть лучше, чем нелинейных животных.

Животные-гнотобионты и животные-гнотофоры. Как линейные, так и нелинейные животные являются носителями возбудителей многих вирусных, бактериальных, грибковых заболеваний, которые затрудняют выполнение точных исследований. Лабораторные животные, лишённые МО (гнотобионты) или имеющие в организме контролируемую микрофлору (гнотофоры).

Перед проведением эксперимента все животные должны быть выдержаны в виварии на 2-х недельном карантине. Животные, взятые в эксперимент, должны быть здоровы, чувствительны к предполагаемому возбудителю, однородны по породе, линии, массе, возрасту, полу, упитанности, промаркированы.

4. Заражение животных одним из способов (подкожный, внутрикожный, внутрибрюшинный, внутримышечный, интрацеребральный, внутривенный, в желудок, интраназальный и др.) в зависимости от тропизма микроба.

5. Регистрация признаков болезни зараженного животного или его смерти.

6. Прижизненный забор материала от животного и проведение бактериологического и серологического исследования, постановка аллергической пробы.

7. Вскрытие, изучение патологоанатомической и патоморфологической картины, протокольный посев органов павших или убитых животных (для выявления обсемененности и выделения чистой культуры). Приготовление мазков-отпечатков из внутренних органов.

8. Идентификация выделенной культуры.

9. Заключение по результатам исследования.

После вскрытия труп животного сжигают, автоклавируют или кипятят 1–2 часа в растворе фенола; инструменты дезинфицируют, очищают, затем стерилизуют. Трупы животных, павших от особо опасных инфекций, вскрывают в специальных помещениях с соблюдением особых мер предосторожности.

Оценка ЭСМИ. Достоинства метода: относительно высокая чувствительность;высокая специфичность; ранний метод исследования. Недостатки метода: длительность; не всегда доступен; опасность инфицирования; дорогостоящий.

Поиск по сайту: