Лабораторные опыты. Опыт 1 Биуретовая реакция (реакция Пиотровского)

Опыт 1 Биуретовая реакция (реакция Пиотровского)

В одну пробирку наливают 10–12 капель раствора яичного белка, в другую насыпают 20–30 мг мочевины и нагревают на спиртовке до исчезновения запаха аммиака и охлаждают. В обе пробирки добавляют по 10 капель 10%-го раствора гидроксида натрия и по 1–2 капли 1%-го раствора сульфата меди (II).

В щелочной среде белки, а также продукты их гидролиза (полипептиды) дают фиолетовое или красно-фиолетовое окрашивание с сульфатом меди. Реакция обусловлена присутствием в белках пептидных связей, которые образуют окрашенные солеобразные комплексные соединения.

Свое название реакция получила от производного биурета, который дает эту реакцию. Биурет образуется при нагревании мочевины с отщеплением аммиака:

Две молекулы диенольной формы биурета взаимодействуют с образующимся в щелочной среде гидроксидом меди (II). Продуктом реакции является комплексное соединение (окрашенная медно-натриевая соль биурета), в котором координационные связи образованы за счет электронных пар атомов азота иминных групп:

Подобным образом построены и окрашенные медно-натриевые соли пептидов и белков.

Опыт 2 Нингидриновая реакция

В две пробирки наливают: в одну 10 капель раствора яичного или растительного белка, в другую 10 капель 0,1%-го раствора глицина. В каждую из них добавляют по 2–3 капли 0,1%-ого нингидрина и нагревают. Через 1–2 мин появляется розовое, затем красное, а затем синее окрашивание.

Нингидриновая реакция обусловлена наличием α-аминокислот и является одной из наиболее чувствительных для обнаружения данных соединений.

Опыт 3 Ксантопротеиновая реакция

В пробирку наливают 8–10 капель яичного или растительного белка, добавляют 3–5 капель концентрированной азотной кислоты и нагревают. В пробирке появляется желтое окрашивание. После охлаждения к смеси добавляют избыток концентрированного раствора аммиака или 30%-го гидроксида натрия. Желтая окраска переходит в оранжевую.

Реакция обусловлена присутствием циклических аминокислот, которые при взаимодействии с азотной кислотой образуют нитропроизводные желтого цвета.

Опыт 4 Реакция Фоля на содержащие серу аминокислоты

К 6–8 каплям раствора белка добавляют 10 капель 30%-го раствора гидроксида натрия и 1 каплю 5%-го раствора ацетата свинца. При длительном нагревании выпадает черный осадок сульфида свинца.

Реакция обусловлена наличием в белке серусодержащих аминокислот, которые под действием щелочи разрушаются с образованием сульфида щелочного металла, который дает с сульфидом осадок сульфида свинца:

Поиск по сайту: