Микрофлора почвы. Санитарно-микробиологическое исследование почвы

Почва является естественной средой обитания многих видов микроорганизмов. Имеются все условия для развития микроорганизмов: достаточное количество влаги, органических и минеральных веществ. В почву с выделениями больных животных, а также с трупами животных, погибших от инфекционных болезней, со сточными водами попадают патогенные микроорганизмы.

На сроки выживания патогенных микроорганизмов оказывают влияния различные факторы (тип почвы, температура, окружающая экология)

К первой группе относятся клостридии, образуют споры и могут попасть с отстатками земля в силосуемую массу.

Вторая группа включает спорообразующие микроорганизмы (возбудители сибирской язвы, столбняка, газовой гангрены), Могут сохранятся длительное время в виде спор.

Третья группа это патогенные м/о попадающие через больных животных и человека, сохраняющие так в течение нескольких недель или месяцев. Сальмонеллы, бруцеллы, микобактерии, лептоспиры и т.д не образуют спор и поэтому быстро гибнут.

Также в почве обитает много плесневых грибов, например, из рода Фузариум, попадая на злаковые и другие растения, в процессе своего развития, вырабатывают токсические вещества.

Определение показателей в почве:

Отбор: на территории выделяют 2 участка до 1000м3 по 25м2,1 участок вблизи другой вдали от источника загрязнения. Отбирают среднюю пробу, составленную из 5 образцов, взятых по диагонали. Образцы берут на глубине до 20 см, при исследовании почвы скотомогильников – ниже глубины захоронения не менее чем на 25 см. Пробы берут стерильным жел. совком. Или специальным буром в стерильные широкогорлые банки, которые закрываются ватными пробками. Указывается дата и номером отобранной почвы. Масса должны быть 200-300 г. Отправляют в лабораторию и исследуют сразу же или не позднее, чем через 12-18 ч.

Определение МАФАнМ в 1г. почвы методом разведения.

1ое разведение 1:10 в колбу емкостью 500 мл. наливают 270 мл стерильной воды, добавляют 30г. почвы, встряхивают несколько мин. и отстаивают для оседания тяж. частиц, м/ останутся в верхнем прозрачном слое. Делают 10кратные разведения для чистых почв 10-4, для загрязненных 1:

Из 2х послед. развед. берут 1 мл. и переносят в ч. Петри., заливают 15 мл охлажденного до 50 град МПА и тщательно перемешивают.Культивируют 24-48 часов при 30 град. Подсчет выросших колоний вв чашках Петри и определения среднеарифметического числа., умножают на степень разведения исслед. почвы и получают число бактерий в 1 г. почвы. в 1г. огородной почвы 1-3 млрд. м/о.

Определение коли-титра.

3 этапа.

Готовят разведения: для чистых почв от 1:10 -1 до 1:10 -3; для загр. от 10 -3 до 1:10 -9. Тщательно перемещ. по 1 мл переносят в пробирки с 9 мл. ср. Кесслера с поплавками. Культивирует при 43*С в теч. 48 ч.

На втором этапе исследования просматривают посевы на ср. Кесслера.Из проросших пробирок с наличием газа делают посев на поверхность агара Эндо в чашках Петри по секторам. Культивир. при 37*С в теч. 24С

На третьем этапе исследуют колонии, выросшие на ср. Эндо. Отмечают и отбирают колонии, готовят мазки, красят по Грамму, микроскопируют. При обнаруж. Гр(-) палочек проводят высев их этих колоний еа ср. Кесслера для подтверждения газообраз. в чистой культуре.

Относ. чистая менее 10 тыс. Выше 1,0

Умер. загрязн. Сотни тысяч 1,0-0,01

Сильная загрязн. Миллионы 0,01-0,001.

Выделение сиб. язвы:1. 100г. исслед. почвы залив. 5-10 кратным объемом стерильного фосфатноо буфера или воды.2.шуттелируют взвесь в теч. 20-30 мин., с последующим 5-8 мин. отстаив.3.Фильтрование через 2-3 слоя марли.4.Прогревание получ. суспензии в водяной бане в теч. 30 мин. при 70С для уничт. сопутствующ. вегетативной микрофлоры. 5. Посев полученной суспензии на поверхность МПА в чашках Петри для получения изолир. колоний. 6.Заражение полученной культурой 5-10 белых мышей, подкожно в дозе 0.1-0.2 мл. 7.Вскрытие павших мышей и выделение чистой культуры возбудителя сиб. язвы.

Поиск по сайту: