 |
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция
Биологический метод диагностики
Кожная проба. В/кожно вводят 0.1 мл тулярина, содержащего 100 млн. КОЕ/мл Francisella tularensis, убитых нагреваем до 70о С. Реакцию учитывают на 1-2-3 сутки (осмотр и пальпация). Положительная проба учитывается при наличии инфильтрата разметом не менее 5 мм (отек и гиперемия). У больных туляремией сенсибилизация наступает рано, уже на 3-4 день (и сохраняется 5-6 лет после выздоровления).
Биологические пробы на животных
Выделить культуру посевом на среды обычно не удается. Поэтому исследуемым материалом заражают белых мышей (п/к), их гибель наступает на 3-4 сутки (при массивном заражении); морских свинок (в/бр) - гибель на 8-10-е сутки; крыс, кроликов. Крысы и кролики погибают лишь при заражении массивными дозами возбудителя (более 109 микробных клеток). Кролики погибают от вирулентного микроба американского типа (тип А) при введении даже 1 микробной клетки. Другие типы франциселл для кроликов умеренно патогенны.
Бактериологическая диагностика
Бактериологический метод в диагностике тулерямии человека редко дает
положительные результаты, так как содержание возбудителей в материале всегда незначительное. Культуру выделяют после накопления ее на восприимчивых животных - белых мышах или морских свинках.
Выделение возбудителя от больного человека наиболее вероятно в лихорадочный период: из крови - до 10 суток от начала заболевания, из
первичных аффектов и пунктатов бубонов - до 2-3 недель.
Франциселлы хорошо культивируются в желточном мешке куриного эмбриона.
Условия культивации на питательных средах:
- Микробы инкубируют в атмосфере 10%-го СО2
- Оптимальный рН 6,8-7,4
- Оптимальная температура 37-37°С
- Растут только на специальных средах с добавками цистеина как стимулятора роста, нативного белка (кровь), экстрактов тканей печени. В среды добавляют антибиотики, подавляющие рост других бактерий. Для выделения чистой культуры используют плотные среды: мозговой, печеночный и селезеночный агары, кровяно-цистеиновую среду.
На желточном агаре, (среда Мак-Коя и Чепина - свернутая желточная /яичная/) рост колоний наблюдается через 2-3 суток.
На кровяно-цистеиновой среде Francisella tularensis дает рост колоний в течение 2-14 суток. На плотных средах растут в виде мелких колоний, похожих на капельки росы, беловатого цвета с голубоватым оттенком (S-диссоциаты). R- формы колоний растут в виде нежного налета с неровной поверхностью.
В жидких средах размножаются хуже и растут только у поверхности среды.
Лабораторная диагностика бруцеллеза
Материал - кровь (микробы размножаются в фагоцитах крови), моча больных, абортированные плоды животных, околоплодные воды, некротизированные участки плаценты, биопсийный материал печени, молоко, иногда СМЖ, костный мозг, воздух, вода.
Микроскопия
- Люминесцентная микроскопия (ИФМ –иммунофлюоресцентный метод)
- Световая микроскопия
Способ окраски: карболовый фуксин разводят водой: 1:5 и наносят на фиксированный мазок на 3 минуты. Препарат промывают водой и дополнительно окрашивают 2% раствором метиленовой синьки в течение 5 минут. Мазок промывают водой, просушивают и микроскопируют. Бруцеллы хорошо окрашиваются в ярко-красный цвет, все другие микробы - в сине-голубой. В мазках из типичных колоний обнаруживаются мелкие бактерии шаровидной, овоидной или палочковидной формы.
Поиск по сайту: