|
|||||||
АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция |
РПГА является ценным диагностическим тестом при всех формах сифилиса, но особенно чувствительна она при поздних формах заболеванияМетодика. Существуют микро- и макромодификации постановки РПГА, чаще используется первая из-за экономичности, быстроты постановки и учета результатов. Кроме того, есть качественный и количественный варианты постановки. Последний позволяет определить титры антител в крови. Но при этом необходимо учесть, что при повторных исследованиях крови в РПГА необходимо использовать одну и ту же тест-систему. Макромодификация постановки качественной РПГА. В 3 лунки полистироловой пластины наливают по 0,4 мл раствора для реакции. В первую и третью лунку добавляют по 0,4 мл испытуемой сыворотки крови. Содержимое лунок перемешивают. Из первой лунки 0,4 мл переносят во вторую, перемешивают и по 0,4 мл удаляют из второй и третьей лунок. Затем в первую и вторую лунки добавляют по 0,05 мл эритроцитарного трепонемного антигенного диагностикума, а в третью - 0,05 мл несенсибилизированных (контрольных) эритроцитов той же концентрации. Осторожным покачиванием пластины смесь в каждой лунке доводят до гомогенного состояния и оставляют пластину на неподвижной поверхности на белой бумаге на 2-4 часа ли до следующего дня для учета результатов. Пластину в этот период не двигают. Макромодификация постановки количественной РПГА. В лунки полистироловой пластины наливают по 0,4 раствора для реакции. В 1-ю и 8-ю лунки добавляют по 0,4 мл испытуемой сыворотки крови; с 1-й по 7-ю лунки делают последовательные разведения сыворотки крови и из 7-й лунки 0,4 смеси удаляют. Затем во все лунки, кроме последней, добавляют по 0,05 мл диагностикума, а в последнюю лунку - 0,05 мл контрольных эритроцитов. Постановка РПГА в микромодификации отличается от предыдущей объёмными соотношениями концентрацией эритроцитов. Реакция иммунофлюоресценции(РИФ) Принцип метода: соединение специфического комплекса антиген-антитело с иммунной антивидовой сывороткой, меченной флюорохромом, и выявление его с помощью люминесцентного микроскопа Методика: из антигена (взвесь патогенных бледных трепонем штамма Никольса из 7-суточного орхита кролика) готовят препараты на тонких, хорошо обезжиренных предметных стеклах, на обратной стороне которых стеклорезом обозначены кружки диаметром 0,7 см (по 10 кружков на 1 предметном стекле). В пределах кружка на стекло наносят антиген (взвесь бледных трепонем), высушивают на воздухе и фиксируют 10 минут в химически чистом ацетоне. Разведенные сорбентом сыворотки крови наносят на антиген так, чтобы равномерно покрыть мазок, и препараты помещают во влажную камеру, которую закрывают крышкой и помещают на 30 минут в термостат при 37°С (1 фаза реакции) после первой фазы препараты осторожно промывают в 2 порциях фосфатного буфера. Причем во вторую порцию препараты помещают на 10 минут, высушивают, после чего их вновь помещают во влажную камеру, наносят разведенную по титру люминесцирующую сыворотку и оставляют при комнатной температуре на 30 минут (2 фаза реакции). По окончании второй фазы препараты промывают фосфатным буфером, как описано выше, высушивают и наносят на поверхность мазков по капле нелюминесцирующего иммерсионного масла. Оценка результатов: учет реакции осуществляется путем оценки свечения бледных трепонем. Положительными считаются те пробы сыворотки крови, которые дают свечение на ++++, +++, ++. Блестящее зелено-жёлтое свечение оценивается на ++++, яркое - +++, слабое свечение -++. Отрицательными считают сыворотки крови, которые дают свечение на + (трепонемы в препарате окрашены интенсивнее фона) или не дают его. Частота (%) положительных результатов в разные периоды сифилиса Таблица 7 . Поиск по сайту: |
Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.003 сек.) |