Лабораторне робота № 15

Тема: “Будова і властивості нуклеопротеїнів. Загальні властивості ферментів”

Мета:вивчити будову і властивості нуклеопротеїдів; на прикладі окремих ферментів вивчити їх загальні властивості.

?Контрольні завдання для домашнього

(письмового) виконання

1. Особливості вторинної структури нуклеїнових кислот. Написати, як утворюється антипаралельні ланцюги в молекулі ДНК.

2. Методи виділення нуклеїнових кислот (в вигляді схеми).

Питання до обговорення

1. Нуклеопротеїди. Нуклеїнові кислоти (ДНК, РНК).

2. Які азотисті основи і вуглевод зустрічаються в ДНК, РНК? Їх формули.

3. Нуклеозиди, мононуклеотиди.

4. Первинна та вторинна структури нуклеїнових кислот.

5. Фізико-хімічні властивості ДНК.

6. Правила Чаргафа.

7. Різновиди РНК. Зазначте роль кожної із них.

8. Фермент. Хімічна природа ферментів. Каталіз.

9. Механізм дії ферментів. Активний центр ферменту.

10. Кофермент, ізофермент, апофермент.

11. Чинники, що впливають на швидкість ферментативної реакції. Активатори та інгібітори ферментів.

12. Класифікація ферментів.

ХІД РОБОТИ

Матеріали і реактиви: штатив для пробірок, пробірки, термостат; дріжджі, 20 %-ний розчин гідроксиду натрію (NаОН), 1%-ний розчин сульфату купруму (СuSО₄), розчин аміаку (NH₄OH), 2%-ний аміачний розчин нітрату аргентуму, молібденовий реактив, 1%-ний розчин дифеніламіну.

Слина, дистильована вода, 1 %-ний розчин крохмалю, розчин йоду в йодиді калію (KJ), 0,4 %-ний розчин гідроксиду натрію (NаОН), 0,4 %-ний розчину хлоридної кислоти (НСl), 0,2 %-ний розчин хлоридної кислоти (НСl), реактив Люголя, реактив Фелінга, екстракт дріжджів, розчин сахарози, розчин натрію хлориду (NaCl), розчин сульфату купруму (CuSO₄).

Дослід 1. Провести гідроліз нуклеопротеїдів дріжджів (проводиться попередньо).

Хід роботи. У пробірку з пробкою, з прилаштованою довгою скляною трубкою, що являє собою зворотній холодильник, вносять біля 1 граму дріжджів та додають 10-15 мл 5%-ого розчину сульфатної кислоти. Нагрівають на піщаній бані протягом 45 хвилин. Після охолодження гідролізат фільтрують і розливають у 4 пробірки (2 − 5 досліди).

Дослід 2. Виявити в гідролізаті білок за допомогою біуретової реакції.

Хід роботи. До 5 крапель гідролізату дріжджів доливають 10 крапель 20 %-ого розчину гідроксиду натрію (NаОН), потім 2 краплі 1%-ого розчину сульфату купруму (СuSО₄). З'являється рожеве або рожево-фіолетове фарбування.

Дослід 3. Виявити в розчині пуринові основи.

Хід роботи. До 10 крапель гідролізату дріжджів додають 10 крапель розчину аміаку (NH₄OH), потім 10 крапель 2%-ого аміачного розчину нітрату аргентуму. Через 3-5 хвилин утворюється пухкий осадок солей пуринових основ.

Дослід 4. Виявити в гідролізаті фосфорну кислоту.

Хід роботи. До 3-5 крапель гідролізату дріжджів додати 20 крапель молібденового реактиву і прокип'ятити на водяній бані декілька хвилин. Розчин жовтіє, при охолодженні утворюється осад жовтого кольору.

Поиск по сайту: