Хід виконання роботи. 1.1-2 г рослинного матеріалу гомогенізують у ступці, додаючи 0,3 г СаСО3

1. 1-2 г рослинного матеріалу гомогенізують у ступці, додаючи 0,3 г СаСО₃. Доливають 20 мл Н₂О_дист і знову розтирають до отримання гомогенної маси, яку кількісно переносять у центрифужні пробірки і центрифугують при 5000 об/хв протягом 10 хвилин.

2. Отриманий супернатант переносять у мірну колбу на 50 мл, додають кілька крапель толуолу і доводять до мітки Н₂О_дист.

3. Для аналізу активності ензиму в дві колби наливають по 20 мл витягу. До контрольної колби, для інактивації ензиму, додають 5 мл 10%-ної Н₂SO₄ .

4. В обидві колби доливають по 10 мл 0,1н пероксиду водню і залишають при кімнатній температурі. Після додавання реактивів вміст колб добре перемішують. Через 20 хв до дослідної колби додають 5 мл 10%-ної Н₂SO₄ для інактивації каталази і зупинки окисно-відновної реакції.

5. Залишок пероксиду водню у кожній колбі титрують 0,1н розчином KMnO₄ до появи стійкого рожевого забарвлення, яке не зникає протягом хвилини.

6. Активність каталази (Х) подають у мкмолях Н₂О₂, який розщепився за дії ензиму за 1 хв в перерахунку на 1г маси сирої речовини:

,

де X – активність каталази;

T – поправка до титру 0,1н KMnO₄;

V₁ – загальний об’єм екстракту;

V₂ – об’єм витягу, взятого для аналізу;

t – час проведення ензиматичної реакції;

n – наважка, г.

7. Висновок.

Поиск по сайту: