Вакцины из убитых бактерий

Процесс изготовления вакцин из убитых бактерий состоит из следующих операций: 1) заготовка посевного материала; 2) массовый посев и выращивание микро­бов; 3) сбор и обработка бактерийной массы (инактивирование, консервирование и стандартизация); 4) раз­ведение маточной взвеси для получения вакцины.

Заготовка посевного материала. Мате­риалом для посева обычно служит суточная бактерий­ная культура — бульонная или агаровая, приготовленная в виде суспензии из штаммов определенного вида, удовлетворяющих требованиям инструкции. Для дости­жения большей эпидемиологической эффективности некоторые вакцины изготавливаются из нескольких (3-5) штаммов одного и того же вида микробов. Такие вакцины называются поливалентными. Каждый штамм бактерий засевается и выращивается отдельно. Бакте­рийная суспензия для посева может быть приготовлена из высушенной культуры производственного штамма; в этом случае ампулу вскрывают, сухую бактерийную массу разводят стерильным, физиологическим раство­ром и используют для посева.

Массовый посев и выращивание бактерий. В настоящее время получение бактерийной массы для изготовления вакцин производят посевом культуры в жидкую питательную среду в специальных котлах-ре­акторах (новый метод) или массовым посевом на плот­ную среду в матрацах или четвертях (старым метод). Детали нового метода изложены в разделе культивиро­вания микроорганизмов. Выращивание ведется при оп­тимальной для данного микроба температуре в течение 12—18—20 часов. Иногда срок инкубации удлиняется.

Сбор и обработка микробной бакте­рийной массы. По истечении срока культивирова­ния производится сбор бактерийной массы и инактивирование ее. Последовательность этих операций опреде­ляется методом выращивания. Так, при использовании жидких питательных сред культура вначале инактивируется в том же реакторе, где производилось выращи­вание, а затем микробная масса отделяется от жидкой части культуры путем центрифугирования на суперцентрифугах. Если применялись плотные питательные сре­ды, то выросшая на них культура смывается физиологи­ческим раствором и собирается- с помощью сифонной трубки в стерильные градуированные бутыли, в кото­рых затем производится инактивирование культуры.

Как в том, так и в другом случаях инактивирование осуществляется чаще всего прогреванием микробной взвеси при 54-58 °С (в зависимости от вида микроба) в течение одного часа с постоянным помешиванием. При­меняется для этой цели также воздействие химических веществ — формалина, добавляемого в концентраций 0,1-1 %, спирта, мертиолята и других. Полученная - инактивированная, так называемая маточная, взвесь подвергается дальнейшей обработке. После проверки стерильности определяется густота полученной суспен­зии. Это осуществляется либо путем сравнения со стандартами мутности, изготовляемыми и рассылаемыми производственным институтам Государственным кон­трольным институтом биологических медицинских препаратов, либо с помощью нефелометра. В настоящее время для целей стандартизации вакцин выпускаются стеклянные стандарты, представляющие собой взвесь мельчайших частиц пирекс-стекла в дистиллированной воде. Они выпускаются в виде набора эталонов различ­ной степени мутности, фотометрически подогнанной к мутности взвеси живых тифозных бактерий определен­ной концентрации.

Инактивированная и стандартизиро­ванная маточная взвесь может сохраняться в хранилище при температуре не выше 8-10 °С 3-6 ме­сяцев; в течение этого времени она должна быть пере­ведена в вакцину.

Маточные взвеси разводятся стерильным физиологиче­ским раствором так, чтобы получить суспензии определенной густоты, установленной для каждого вида вак­цин специальными инструкциями. Исходя из общего количества маточной взвеси и ее густоты, рассчитывают необходимое количество физиологического раствора, которое нужно взять для разведения, чтобы получить вакцину нужной густоты. После произведенных расче­тов к специально заготовленному физиологическому раствору, содержащему 0,25-0,5 % карболовой кисло­ты, добавляют необходимое количество маточной взве­си. Густоту полученной суспензии проверяют и оконча­тельно коррегируют, если в этом есть необходимость, по стандартам мутности.

Для получения серии, которая должна содержать не­сколько разных антигенов, смешивают исходные маточ­ные взвеси разных видов в количествах, определяемых густотой каждой взвеси и тем соотношением микробов, которое установлено для готовой вакцины.

Каждый этап обработки вакцины заканчивается контролем стерильности. В качестве консерванта к вак­цине добавляют химически чистую карболовую кислоту (0,5 %) либо мертиолят (1:10000). Помимо проверки стерильности и соответствия стандарту, на разных эта­пах приготовления контролируют безвредность, иммуногенность и переносимость вакцин. Детали проведения этих контролей изложены в разделе контроля препара­тов вообще и в частном разделе применительно к осо­бенностям каждой вакцины. Проконтролированные вак­цины передаются в РФО, где разливаются и фасуются в соответствии с положениями инструкции по выпуску каждого вида вакцины.

Вакцины из убитых бактерий применяются для профилактики брюшного тифа, паратифов А и В, дизенте­рии, холеры, лептоспирозов, коклюша. К их числу могут быть присоединены вакцины, применяемые для лечеб­ных целей, при некоторых хронических и вяло протека­ющих инфекциях, как то: бруцеллез, туляремия, дизен­терия, гонорея, коклюш. При некоторых гнойных забо­леваниях применяются стафилококковые и стрептокок­ковые вакцины, которые иногда рекомендуют готовить из штаммов, выделенных от больного. В таких случаях препарат называют аутовакциной.

Поиск по сайту: