А. Термическая обработка

Имеется множество вариантов, но термическая обработка применима лишь в отношении термоустойчивых материалов и сред.

1. Стерилизация в пламени (фламбирование). Этот способ применяется для стерилизации бактериологических петель, игл, предметных и покровных стекол, пинцетов и других мелких металлических и стеклянных предметов.

2. Стерилизация кипячением используется в основном для обработки игл, шприцев, хирургических инструментов. Она проводится в специальных стерилизаторах (рис. 16) в течение 30 минут. Для повышения точки кипения и устранения жесткости воды добавляют 1 % соды. Этот метод не обеспечивает полной стерилизации, так как споры некоторых бацилл выдерживают кипячение в течение нескольких часов.

3. Стерилизация сухим жаром проводится в сухожаровых шкафах, рис. 17, (металлических двустенных шкафах, изолированных асбестом или линолеумом, с отверстием в верхней части для термометра). Электрические аппараты для стерилизации горячим воздухом разнообразны по форме, снабжены хорошей тепловой изоляцией.

Необходимая температура поддерживается автоматически при помощи терморегулятора, работу которого можно наблюдать с помощью контрольной лампы. Стерилизуют горячим воздухом при 160°С в течение 1,5 часа с момента достижения этой температуры.

Рис. 16. Стерилизатор-кипятильник

При 170°С бумага и вата желтеют, при более высоких температурах обугливаются. В сухожаровых шкафах стерилизуют лабораторную посуду: чашки Петри, вложенные в специальные металлические пеналы или обернутые в бумагу по одной или несколько штук в пачке, пастеровские и градуированные пипетки, закрытые с одного конца ватой, находящиеся в металлических пеналах или завернутые в бумагу по 10-15 штук. Пробирки и колбы закрывают ватными пробками.

4. Стерилизация паром является наиболее эффективным методом и осуществляется двумя способами: насыщенным паром под давлением и текучим паром.

а) Стерилизация паром под давлением производится в автоклаве (рис. 18, 19), который представляет собой толстостенный котел цилиндрической формы, покрытый снаружи кожухом, закрывающийся крышкой.

Рис. 17. Сушильные шкафы различной конструкции для стерилизации сухим нагретым воздухом.

Рабочая камера получает пар от парообразователя, помещенного под камерой и соединенного с ней патрубком. Вода в котел поступает через воронку, соединенную с указательной трубкой. Вода в котле нагревается электрическим током от сети. Крышка автоклава имеет внутри электронагревательный элемент с регулятором, посредством которого регулируется нагрев воды. Контроль за давлением производится с помощью манометра. Для автоматического выхода пара при превышении максимального рабочего давления предусмотрен предохранительный клапан. На шкале манометра обозначается только избыточное давление, нормальное же давление соответствует показанию «О». Работа с автоклавом требует строгого выполнения правил, предусмотренных специальной инструкцией, прилагаемой к каждому аппарату.

Инструкцией предусматривается:

1. Перед работой проверить исправность всех частей автоклава.

2. Через воронку налить воду в маленький котел и закрыть кран.

3. Загрузить стерилизационную камеру материалом, подлежащим стерилизации, закрыть крышку.

4. Включить нагревательную систему при открытых паровыпускающих кранах; с появлением пара будет выходить воздух, а затем пар с конденсатом. Кран закрывают, когда воздух из автоклава полностью вытеснен, о чем свидетельствует непрерывная струя пара. При наличии воздуха в автоклаве показания манометра не соответствует температуре.

5. По окончании стерилизации выключают электронагревательный элемент. После того как давление упадет до нуля, открывают спускной кран и приступают к разгрузке автоклава.

При давлении в 0,5 атм температура в автоклаве равна 110-112°С, в 1 атм – 120-121°, в 1,5 атм – 124-126°, в 2 атм – 132-133°С.

Рис. 18. Автоклав для стерилизации паром под давлением: общий вид

Рис. 19. Схема устройства автоклава: 1 – стерилизационная камера; 2 – электрощит; 3 – нагревательное приспособление; 4 – предохранительный клапан; 5 – переключатель; 6 – выключатель; 7 – сигнальная лампа; 8 – паровая камера; 9 – кожух; 10 – манометр; 11 — крышка; 12 – штурвал; 13 – выпускной кран; 14 – патрубок с вентилем; 15 – воронка; 16 — водомерное стекло; 17 — парообразователь: 18 – отверстиедля прохода пара

Для контроля работы автоклава между стерилизуемыми предметами кладут стеклянную запаянную трубку с веществом, имеющим определенную точку плавления (бензонафтол – 110°, бензойная кислота – 120° и др.), и небольшим количеством анилинового красителя. Эффективность стерилизации можно также проверить, помещая в автоклав материал, заведомо зараженный спорами бацилл.

б) Стерилизация текучим паром производится в аппарате Коха, широко применяющемся в лабораторной практике. Аппарат Коха представляет собой металлический цилиндр, покрытый теплоизоляционным материалом. В конической крышке аппарата имеется отверстие для выхода пара. В нижней части расположены кран и водомерная трубка. Внутри имеется подставка для стерилизуемых материалов. На дно аппарата заливается вода, которая не должна касаться стерилизуемого материала. Стерилизуют при 100° в течение 30-60 мин с момента начала кипения воды, при этом вегетативные формы микробов погибают, а споры сохраняются, и при комнатной температуре через сутки прорастают. Повторное воздействие паром снова обезвреживает вегетативные формы. Третье прогревание убивает все остальные бациллы, развивающиеся из спор. Стерилизуют таким методом (дробно) питательные среды и другие материалы, изменяющие свои свойства при температуре выше 100°: молоко, желатину, картофельные среды и среды с углеводами.

Стерилизация текучим паром может производиться в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Текучим паром стерилизуют и одновременно уплотняют сыворотки, яичные и другие среды. Свертывание сыворотки происходит при 80-90° в течение часа в специальном двустенном свертывателе, покрытом теплоизоляционным материалом. На дно в наклонном положении укладывают пробирки со средами, аппарат накрывается вначале стеклянной крышкой, а затем металлической. Вода в аппарат наливается через отверстие, находящееся в верхней части, оно закрывается пробкой, в которую вставлен термометр. В настоящее время широко применяются аппараты с электрическим нагревом.

5. Тиндализация представляет собой дробную стерилизацию при температуре ниже 60°, предложенную Д.Тиндалем веществ, легко разрушающихся и денатурирующихся при 60-100° (сыворотки, витамины). Нагревание производится в специальных приборах с терморегуляторами или в обычных водяных банях повторно в течение 5-6 дней при температуре 56-58° по 1 часу.

6. Пастеризация (частичная стерилизация). Этот метод был предложен Л. Пастером и направлен на уничтожение бесспоровых форм, преимущественно патогенных видов, споры же сохраняются жизнеспособными. Методом пастеризации обезвреживают различные продукты однократным нагреванием до 65-70° в течение 1 часа или до 70-80° 5-10 мин. Молоко пастеризуют с целью освобождения его от молочнокислых и патогенных бактерий (возбудителей туберкулеза, бруцеллеза, стафилококкозов и др.). При пастеризации пива, вина, плодовых соков уничтожаются возбудители болезней этих напитков. Витамины и вкусовые качества продуктов сохраняются. Пастеризованные продукты хранят в условиях холодильника.

Поиск по сайту: