Метод диффузии в агар (метод бумажных дисков)

Наиболее прост и доступен метод определения чувствительности бактерий с помощью дисков, пропитанных антибиотиками. В стерильные чашки Петри, расположенные на горизонтальной поверхности, разливают по 15 мл МПА или другой питательной среды. Среда подсушивается в термостате и засевается исследуемым материалом методом «газона».

Для посева используют взвесь патологического материала (кал, молоко, гной, моча и др.) или выделенную чистую культуру возбудителя. Бактериальную взвесь равномерно распределяют по поверхности плотной питательной среды с помощью шпателя и чашки Петри, подсушивают вновь в термостате.

На поверхности засеянного агара пинцетом раскладывают диски с антибиотиками – по 5-6 дисков на каждую чашку на расстоянии 25 мм от центра чашки. Чашки выдерживают в термостате при 37°С 16-18 ч, после чего учитывают результаты опыта путем измерения зон задержки роста микробов вокруг дисков, включая диаметр самого диска. Размер зон зависит от степени чувствительности возбудителя к данному антибиотику. При зоне диаметром до 10 мм штамм расценивается как устойчивый, 11-15 мм - как малоустойчивый, 15-25 мм - как чувствительный. Зоны, превышающие 25 мм, свидетельствуют о высокой чувствительности микроорганизма к данному антибиотику (рис. 32).

Рис. 32. Метод диффузии в агар (метод бумажных дисков): определение чувствительности стафилококков – I – штамм 26, II – штамм 32; А – к пенициллину, Б – к стрептомицину, В – к неомицину

Поиск по сайту: