Механические методы

Они основаны на фильтрации жидкостей через мелкопористые бактериальные фильтры, которые задерживают видимые под микроскопом микроорганизмы. Через них свободно проходят вирусы и микоплазмы, поэтому данные методы следует признать как «частичную» стерилизацию.

Фильтрование – один из очень удобных методов стерилизации тех жидкостей, которые нельзя простерилизовать другими способами, например, сыворотку крови, питательные среды и др.

Наиболее широко в микробиологической практике используют фильтры-свечи и пластинчатые фильтры.

Фильтры-свечи (рис. 20) имеют форму цилиндра с толстыми стенками и с полостью внутри. Одна группа свеч (Беркефельда) изготавливается из инфузорной земли. По величине пор в порядке уменьшения они обозначаются буквами W, N, V.

Рис. 20. Смонтированные свечи: фильтруемую жидкость наливают внутрь свечи (А), свеча погружается в фильтруемую жидкость (Б)

Другая группа свечей (Шамберлана) изготавливается из каолина с примесью песка и кварца. Они имеют различные размеры пор, условно обозначаемые L₁, L₂, L₃, и т.д.

Фильтрация жидкостей через свечи может производиться двояко: под повышенным или пониженным давлением. В первом случае через свечу пропускают фильтруемую жидкость под давлением. Для этого жидкость наливают в сосуд, к которому присоединяют свечу. Нагнетательным насосом накачивают в этот сосуд воздух, который давит на жидкость; последняя поступает в полость свечи и просачивается через поры. Просочившаяся жидкость поступает в другой сосуд, в который вставлена свеча, а из него в присоединенную резиновой трубкой колбу. Давление, создающееся накачиванием воздуха, определяется манометром.

Во втором случае фильтрация производится с помощью уменьшения (создания вакуума) в сосуде, куда должна поступить профильтрованная жидкость. Свечу помещают в сосуд с фильтруемой жидкостью и соединяют трубкой с другим сосудом, из которого откачивается воздух. В результате откачивания воздуха создается значительное разрежение как в пустом сосуде, так и в полости соединенной с ним свечи. Жидкость из сосуда, в который помещена свеча, в силу разности давления устремляется в полость свечи (проходит через поры) и поступает в сосуд.

Перед фильтрацией обязательно должны быть простерилизованы свечи, трубки, соединяющие их с сосудами, и сами сосуды.

Отечественные асбестовые фильтры выпускаются с обозначениями Ф₂ и СФ, последние являются стерилизующими мембранными фильтрами. Особенно широкое применение нашли так называемые мембранные фильтры, которые изготавливают из асбеста, бумаги, коллодия, ацетата целлюлозы. Обычно эти фильтры представляют собой диски различного диаметра. Такие диски пронизаны бесчисленным множеством мельчайших цилиндрических отверстий. В зависимости от способа изготовления фильтров диаметр этих отверстий может быть от 1 мкм до менее 0,005 мкм.

Мембранные фильтры монтируют в приборе Зейтца, который состоит из стакана (воронки) и колбы Бунзена, на тубус этой колбы надевают резиновый вакуумный шланг с ватным фильтром (рис. 21).

Собранный прибор завертывается в бумагу и стерилизуется ав-гоклавированием.

Жидкость, подлежащую стерилизации, наливают в воронку прибора, внутри которого создается вакуум и жидкость фильтруется, освобождаясь от бактерий.

Перед стерилизацией лабораторную посуду моют и сушат. Пробирки, флаконы, бутылки, колбы закрывают ватно-марлевыми пробками. Поверх пробирки на каждый сосуд надевают бумажный колпачок. Чашки стерилизуют завернутыми в бумагу по 2-4 штуки.

Для стерилизации пипеток в верхнюю часть каждой из них вкладывают кусочек ваты и затем заворачивают пипетки в плотную бумагу, нарезанную предварительно полосками шириной 2-2,5 см и длиной 50-70 см. На бумаге пишут объем завернутой пипетки. Пипетки можно стерилизовать также в специальных пеналах.

Рис. 21. Фильтр Зейтца с приемником

Мелкие металлические инструменты (петли, иглы, пинцеты, ножницы) стерилизуют прокаливанием в пламени непосредственно перед использованием. Изделия из резины (резиновые пробки, перчатки, шланги) стерилизуют автоклавированием. Предметы, изготовленные из термолабильных материалов: пластмасс, например, центрифужные пробирки, стерилизуют УФ-лучами, окисью этилена.

Поиск по сайту: