АвтоАвтоматизацияАрхитектураАстрономияАудитБиологияБухгалтерияВоенное делоГенетикаГеографияГеологияГосударствоДомДругоеЖурналистика и СМИИзобретательствоИностранные языкиИнформатикаИскусствоИсторияКомпьютерыКулинарияКультураЛексикологияЛитератураЛогикаМаркетингМатематикаМашиностроениеМедицинаМенеджментМеталлы и СваркаМеханикаМузыкаНаселениеОбразованиеОхрана безопасности жизниОхрана ТрудаПедагогикаПолитикаПравоПриборостроениеПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРадиоРегилияСвязьСоциологияСпортСтандартизацияСтроительствоТехнологииТорговляТуризмФизикаФизиологияФилософияФинансыХимияХозяйствоЦеннообразованиеЧерчениеЭкологияЭконометрикаЭкономикаЭлектроникаЮриспунденкция

Колориметрические методы определения сахаров

Читайте также:
  1. I Определения
  2. I. Дайте определения следующих правовых категорий.
  3. I. Открытые способы определения поставщика.
  4. II. Исследование пульса, его характеристика. Места определения пульса.
  5. II. Методы непрямого остеосинтеза.
  6. II. Рыночные методы.
  7. III. Используемые определения и обозначения
  8. III. Методы искусственной физико-химической детоксикации.
  9. III. Параметрические методы.
  10. IV. Современные методы синтеза неорганических материалов с заданной структурой
  11. А. Механические методы
  12. Автоматизированные методы

Методы основаны на измерении оптической плотности раствора, полученного после реакции сахара с реактивом, образующим с ним окрашенное соединение. Оптическая плотность прямо пропорциональна концентрации сахарного раствора. Содержание сахара вычисляют по уравнению закона Бугера или находят по калибровочному графику зависимости оптической плотности от концентрации. Для определения сахаров, содержащих альдегидную группу, применяют реактив антрон, а для сахаров, содержащих кетонную группу – резорцин.

Антроновый метод определения альдоз. Антрон – твердое кристаллическое вещество; товарное название 10-дигидро-9-кетоантрацена. Реакцию сахаров с антроном проводят при нагревании в сильнокислой среде. При этом от молекулы сахара отщепляются три молекулы воды, а из пентоз образуется фурфурол.

Гексозы в этих условиях превращаются в оксиметилфурфурол. Сложные сахариды в условиях опыта предварительно гидролизуются до моносахаридов.

Фурфурол и оксиметилфурфурол, вступая во взаимодействие с антроном, образуют окрашенные соединения: производное фурфурола с антроном имеет желтый цвет, а оксиметилфурфурола – голубовато-зеленый цвет. Поэтому максимумы светопоглощения у них находятся в разных областях спектра: у производных пентоз при длине волны 413 нм, а гексоз – 610 нм. Различие в максимумах светопоглощения дает возможность определить один сахар в присутствии другого.

Величина коэффициента поглощения вещества зависит не только от природы вещества, поглощающего свет, но и от длины волны света. Так как светофильтры фотоэлектроколориметров пропускают не строго монохроматический свет, а какую-то узкую спектральную полосу, то в зависимости от ширины этой полосы будут получаться разные значения коэффициента поглощения. Поэтому эту величину определяют для каждого фотоэлектроколориметра и периодически проверяют ее.

Концентрация сахарного раствора, приготовленного для колориметрирования, и длина кюветы должны быть такими, чтобы величина оптической плотности находилась в пределах 0,2 – 0,5. При измерении в этом диапазоне ошибка в определении концентрации сахара не превышает 1,5 – 2 %. Обычно готовят растворы, содержащие 8 – 10 мг сахара в 100 см3.

Антроновый метод применяют для определения содержания сахаров в зерне и полупродуктах спиртового производства, в плодово-ягодном сырье, спиртованных соках и морсах, а также в готовых ликероводочных изделиях, который получил признание в промышленности за его простоту и высокую производительность.

В плодово-ягодном сырье и получаемых из него соках и морсах содержатся глюкоза, фруктоза и сахароза, которая в условиях антроновой реакции гидролизуется до глюкозы и фруктозы. Расчет содержания сахара производится по уравнению, в которое вводят коэффициент разбавления. Коэффициент поглощения определяют по раствору химически чистой сахарозы.

Аппаратура и реактивы. Мерные колбы вместимостью 100, 200 и 250 см3; пипетки вместимостью 5, 10, 20, 50 см3; воронки; химические стаканы на 50 и 300 см3; пробирки из тугоплавкого стекла с пришлифованной пробкой вместимостью 15 – 20 см3; бюретка вместимостью 10 – 25 см3; водяная баня со штативом для пробирок; фотоэлектроколориметр; раствор антрона с массовой долей 0,2 %.

Для приготовления раствора антрона в мерную колбу на 250 см3 помещают 0,9175 г х. ч. антрона, растворяют его в 100 – 150 см3 серной кислоты, выдерживающей пробу Савалля (d = 1,830), объем доводят до метки той же кислотой, перемешивают и выдерживают в течение 4 ч при комнатной температуре в темном месте. При хранении в холодильнике раствор пригоден в течение 12 – 15 сут.

Проведение анализа. В мерную колбу вместимостью 250 см3 пипеткой вносят 5 см3 сока или морса, объем доводят до метки дистиллированной водой, раствор перемешивают и фильтруют через сухой бумажный фильтр в сухой стакан. Мутный фильтрат возвращают на фильтр, добиваясь полной прозрачности. 20 см3 фильтрата сока или 50 см3 фильтрата морса пипеткой переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3, объем доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.

В пробирку с притертой пробкой из бюретки отмеривают 5 см3 раствора антрона и осторожно по стенке так, чтобы жидкости не смешивались, добавляют 2,5 см3 приготовленного раствора сока или морса. В другой пробирке готовят «холостой» опыт, добавляя также к 5 см3 раствора антрона 2,5 см3 дистиллированной воды. Пробирки со смесями плотно закрывают пробками, одновременно энергично встряхивают в течение 10 с и устанавливают в штатив, который погружают в кипящую водяную баню. Через 5,5 мин (общее время нагревания 6 мин) пробирки вынимают, помещают в баню с проточной водой и содержимое пробирок охлаждают до 20 оС.

Оптическую плотность растворов определяют в кюветах шириной 3 мм со светофильтром, имеющим максимум поглощения при длине волны 610 нм. В одну кювету наливают испытуемый раствор, а в две другие - раствор «холостого» опыта. Кюветы 2 – 3 раза ополаскивают соответствующим раствором, а затем заполняют, не доливая до краев на 5 мм. Внешние стенки кювет обмывают водой, вытирают насухо фильтровальной бумагой, следя за тем, чтобы на поверхности не оставалось волокон бумаги. После этого измеряют оптическую плотность раствора, 2 – 3 раза снимая показания фотоэлектроколориметра. За оптическую плотность раствора принимают среднеарифметическое из всех измерений. Затем рассчитывают содержание сахара в соке, г на 100 см3, по формуле

С= K · D · n: 1000,

где К – коэффициент, полученный опытным путем; D - оптическая плотность; n — коэффициент разбавления; 1000 - коэффициент перевода миллиграммов в граммы.

Определение коэффициента К. На аналитических весах в стаканчик отвешивают 0,2000 г х. ч. сахарозы и без потерь переносят ее в мерную колбу вместимостью 200 см3, доводя объем до метки дистиллированной водой при тщательном перемешивании. Для приготовления рабочего раствора, содержащего 8 мг сахарозы в 100 см3, 8 см3 основного раствора сахарозы переносят пипеткой в мерную колбу вместимостью 100 см3, доливают до метки дистиллированную воду и перемешивают. Затем в 5 – 6 пробирок с пришлифованными пробками отмеривают по 5 см3 раствора антрона и по 2,5 см3 рабочего раствора сахарозы. После наполнения всех пробирок приступают к смешиванию их содержимого, встряхивая одновременно по две пробирки. Все пробирки устанавливают в штатив, проводят реакцию антрона с сахаром и измеряют оптические плотности полученных растворов. За оптическую плотность стандартного раствора принимают среднеарифметическое значение из всех параллельных определений. Коэффициент К вычисляют по уравнению K = C: D.

 

Контрольные вопросы

 

1. Какими основными компонентами представлены в растительном сырье сухие вещества?

2. Какова классификация методов определения углеводов?

3. Какова сущность поляриметрических методов определения углеводов?

4. Что представляет собой сахариметр, каким образом градуирована его шкала?

5. Каким образом можно охарактеризовать устройство и порядок работы на сахариметре СУ – 3?

6. В чем состоит поляриметрический метод определения сахаров?

7. Какова сущность и ход работы при определении условной крахмалистости зерна методом Эверса?

8. Каким образом классифицируют химические методы определения углеводов?

9. Каким образом осуществляют определение мальтозы в пивном сусле по Бертрану?

10. Каким образом осуществляют метод, основанный на окислении альдоз йодом?

 


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 |

Поиск по сайту:



Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Студалл.Орг (0.004 сек.)